申请日2009.08.03
公开(公告)日2010.01.20
IPC分类号C12N1/16; C12R1/645; C12R1/72; C02F3/34
摘要
本发明公开了一种耐低温酵母菌Candida santamariae CGMCC No 2959和Trichosporon akiyoshi dainum CGMCC No 3150及其在低温污水处理中的应用。本发明通过将保藏的菌种选择MYGP培养基，pH自然，121℃灭菌20min，以平板划线或涂布的方法接种于MYPG培养基表面，在最适培养温度下恒温培养3-5天，将增殖培养的菌株单独或混合接种于生活污水、工业废水中，在10-20℃下通培养、检测，菌种混合在有机废水生物处理中作用突显，有效提高低温条件下有机废水生物处理效率，优于单独菌在有机废水生物处理中作用，本发明菌种广泛应用于低温污水处理领域。
权利要求书
1、一种在进行有机废水低温污水处理中的耐低温酵母菌Candida santamariae CGMCC No 2959和Trichosporon akiyoshidainum CGMCC No 3150。
2、如权利要求1所述的耐低温酵母菌Candida santamariae CGMCC No 2959。
3、如权利要求1所述的耐低温酵母菌Trichosporon akiyoshidainum CGMCC No 3150。
4、一种利用权利要求1所述的耐低温酵母菌：Candida santamariae CGMCC No 2959和Trichosporon akiyoshidainum CGMCC No 3150在进行有机废水低温污水 处理中的应用。
5、一种利用权利要求2所述的耐低温酵母菌Candida santamariae CGMCC No 2959在进行有机废水低温污水处理中的应用。
6、一种利用权利要求3所述的耐低温酵母菌Trichosporon akiyoshidainum CGMCC No 3150在进行有机废水低温污水处理中的应用。
说明书
耐低温酵母菌及其在污水处理中的应用
发明领域
本发明涉及污水生物处理技术领域，特别是涉及耐低温酵母菌及其在污水 处理中应用的技术领域。
背景技术
随着经济的发展和社会的进步，人们越来越重视环境的保护和可持续发展， 污水的处理是其中不可忽视的问题之一。水质的恶化，生态环境的破坏，严重 威胁人们的生存环境，所以加强污水处理，对于保障我国水资源可持续发展具 有重要的社会和经济意义。
在我国广大的北方寒冷地区低温污水处理已成为水处理工程界和科学界的 难点问题。冬季城市污水的水温一般在10℃左右，少数地区降至4-6℃，传统生 物处理技术中微生物的代谢能力受低温条件有所抑制，其活性、种群组成、细 胞的增殖、产酶性能和絮凝沉降性能等都受到低温的影响，有机物的去除效果 差。因此筛选耐低温菌进行污水处理，对于缓解严寒地区的环境污染、进一步 降低寒冷地区污水处理项目建设的投资、节约能源等方面起到巨大的推动作用。
酵母菌污水处理技术是20世纪70年代从日本兴起的一种污水处理技术， 比传统的活性污泥法工艺具有一定特异性，效率是活性污泥法工艺的8～10倍。 因其具有细菌的特点，如以单细胞形式存在、生长繁殖快、能形成较好的絮凝 体;又具有丝状真菌的特点，如细胞较大、代谢旺盛，对COD的去除速度较快， 而成为近几年来开发出的一种新型污水处理工艺，在处理负荷、污泥生成量、 需氧量等方面具有很大的优势。酵母菌喜在含糖较高的酸性水生环境中生长， 利用其处理含较多糖类、淀粉、油脂和蛋白质等的生活污水和含糖、油脂、味 精、赖氨酸等的工业废水，都能取得很好的效果，表现出明显的优越性。因耐 低温酵母菌对环境温度的适应范围较宽，在低温条件下具有较好的生长特性， 使其很适合在低温污水处理中加以利用。
发明内容
本发明的目的在于通过获得耐低温酵母菌以及通过对获得菌发酵培养进行 有机废水的生物处理，以提高低温条件下生物处理的效率。
本发明提供了耐低温酵母菌Candida santamariae CGMCC No 2959和 Trichosporon akiyoshidainum CGMCC No 3150及其在低温污水处理中的应用。
本发明耐冷菌株都是从新疆低温环境中分离筛选，其中L231和L194的获 得具有低温污水处理功能，经微生物学分类与鉴定，确定L231为Candida santamariae，L194为Trichosporon akiyoshidainum，同时经验证获得菌种混合在 有机废水生物处理中作用突显，有效提高低温条件下有机废水生物处理效率， 优于单独菌在有机废水生物处理中作用。
具体的，本发明提供的菌L231，其能够在有机废水生物处理中应用，提高 在低温条件下生物处理的效率。该菌株已于申请日前保藏于布达佩斯条约微生 物国际保藏单位：中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心(CGMCC)。 地址：北京市朝阳区大屯路，中国科学院微生物研究所，邮编：100101，保藏 日期是2009年3月18日，保藏号是CGMCC No 2959。经微生物学鉴定为 Candida santamariae。该耐低温酵母L231，该菌生长温度范围0-35℃，最适生 长温度10-15℃;该菌生长于在MYPG培养基为麦芽浸粉3g，酵母膏3g，蛋白 胨5g，葡萄糖10g，琼脂30g，H2O 1000ml，pH自然，121℃灭菌20min，菌 落呈白色，光滑，蜡状，圆形，边缘整齐;菌体细胞呈椭圆形，出芽生殖，能 形成假菌丝;参照Barnett等编著的《酵母菌：特征与鉴定》对L231菌株进行 形态学，生理生化鉴定，再经ITS1、ITS2序列测定与同源进化对比分析，最终 确定为Candida santamariae L231。
本发明提供的菌L194，其能够在有机废水生物处理中应用，提高在低温条 件下生物处理的效率。该菌株已于申请日前保藏于布达佩斯条约微生物国际保 藏单位：中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心(CGMCC)。地址： 北京市朝阳区大屯路，中国科学院微生物研究所，邮编：100101，保藏日期是2009 年6月29日，保藏号是CGMCC No 3150。经微生物学鉴定为Trichosporon akiyoshidainum。该耐低温酵母菌L194，该菌生长温度范围0-35℃，最适生长温 度15-20℃;该菌生长于MYPG培养基为麦芽浸粉3g，酵母膏3g，蛋白胨5g， 葡萄糖10g，琼脂30g，H2O 1000ml，pH自然，121℃灭菌20min，表面菌体细 胞芽殖，芽殖孢子卵形或椭圆形;有菌丝生成，有假菌丝和桶空型隔膜的有隔 菌丝，产生分生节孢子，节孢子矩形，两端圆滑;参照Barnett等编著的《酵母 菌：特征与鉴定》对L194菌株进行形态学，生理生化鉴定，再经ITS1、ITS2 序列测定与同源进化对比分析，最终确定为Trichosporon akiyoshidainum。
L194和L231可采用斜面传代培养保存方式，或真空冷冻干燥方法，或液 体石腊包埋的方法进行长期的保藏。其中斜面培养方式适合于L194和L231的 固体培养基进行培养，最适培养温度分别为15-20℃、10-15℃、培养时间为3～ 5天，待菌落形成后置于4℃下恒温保藏，3～6个月传代一次。利用真空干燥法 或液体石腊包埋法进行菌种保藏，在低温或常温下可保藏1年以上。
长期保藏的菌种在使用之前首先在适宜于L194和L231菌株生长的培养基 上进行增殖培养，在本发明中选择MYGP培养基，pH自然，121℃灭菌20min， 以平板划线或涂布的方法拉接种于MYPG培养基表面，要最适培养温度下恒温 培养3-5天，同时检测是否有杂菌污染。将增殖培养的L194和L231菌株单独 或混合接种于生活污水、工业废水中，本发明优选富含有机质的生活污水或工 业废水，在10-20℃下通培养，检测培养过程中COD的变化情况。
通过实施本发明具体的发明内容，可以达到以下有益效果：
本发明定向筛选到耐冷菌：Candida santamariae CGMCC No 2959和 Trichosporon akiyoshidainum CGMCC No 3150，经实验证明获得菌种混合在有机 废水生物处理中作用突显，有效提高低温条件下有机废水生物处理效率，优于 单独菌在有机废水生物处理中作用。