申请日2009.08.03
公开(公告)日2010.01.20
IPC分类号C12N1/20; C02F3/34; C12R1/01; C12R1/38; C12R1/20
摘要
本发明公开了一种耐冷菌Janthino bacterium lividum CGMCC No 2956、Flavobacterium hercynium CGMCC No 2957和Pseudomonas gessardii CGMCC No2958及其在低温污水处理中的应用。本发明通过将保藏的菌种选择完全培养基：蛋白胨10g，酵母浸膏5g，K2HPO4 3g，葡萄糖1g，H2O 1000ml中，在pH 7.0，121℃灭菌20min，将增殖培养的菌株单独或混合接种于低温污水中，在10-30℃下通气培养、检测，菌种混合在低温污水处理中作用优于单独菌的作用，本发明菌种广泛应用于低温污水处理领域。
权利要求书
1、一种进行污水生物处理的耐冷菌：Janthinobacterium lividum CGMCC No 2956、 Flavobacterium hercynium CGMCC No 2957和Pseudomonas gessardii CGMCC No 2958。
2、如权利要求1所述的耐冷菌Janthinobacterium lividum CGMCC No 2956。
3、如权利要求1所述的耐冷菌Flavobacterium hercynium CGMCC No 2957。
4、如权利要求1所述的耐冷菌Pseudomonas gessardii CGMCC No 2958。
5、一种利用权利要求1所述的耐冷菌：Janthinobacterium lividum CGMCC No 2956、Flavobacterium hercynium CGMCC No 2957和Pseudomonas gessardii CGMCC No 2958在低温污水处理中的应用。
6、一种利用权利要求2所述的耐冷菌Janthinobacterium lividum CGMCC No 2956 在低温污水处理中的应用。
7、一种利用权利要求3所述的耐冷菌Flavobacterium hercynium CGMCC No 2957 在低温污水处理中的应用。
8、一种利用权利要求4所述的耐冷菌Pseudomonas gessardii CGMCC No 2958 在低温污水处理中的应用。
说明书
耐冷菌及其在污水处理中的应用
发明领域
本发明涉及污水生物处理技术领域，特别是涉及耐低温混合菌、菌群以及 在污水处理中应用的技术领域。
背景技术
水资源是一种极其重要的自然资源，水资源的短缺与污染已成为制约国民 经济发展、生态环境建设的重要因素。因此，污水的处理与再利用对提高水资 源的利用、保障国民经济发展与生态建设具有重大意义。
生理处理法是目前最为常用的污水处理方法，但现在的生物处理法工艺中 生物处理单元由于微生物活性受温度影响，随温度的下降其处理能力下降，导 致整个处理工艺的处理效率与效果的下降，污泥膨胀等现象出现。我国北方地 区冬季气候寒冷漫长，冰冻期长达3～6个月，受气候条件的影响，一般采用延 长污水停留时间、降低污泥负荷、增加污泥回流量、对构筑物采取保温或升温 等措施来保证冬季污水处理出水达标，这无疑会增加运行周期和运行费用，而 根本的决办法是解决生物处理单元中微生物对环境的温度的适应能力。
在自然微生物中存在一类对中温和低温环境具有较高适应能力的耐冷微生 物，若能将这一类微生物应用于污水的处理，将有效解决现在污水生物处理工 艺受季节变化的影响。
发明内容
本发明的目的在于通过获得耐冷菌株、菌群以及通过对获得菌发酵培养进 行污水的生物处理，以提高低温条件下污水生物处理效率。
本发明提供了进行污水的生物处理的耐冷菌：Janthinobacterium lividum CGMCC No 2956、Flavobacterium hercynium CGMCC No 2957和Pseudomonas gessardii CGMCC No 2958。
本发明耐冷菌株都是从新疆低温环境中分离筛选，其中L126、L146、L188 的获得具有低温污水处理功能，经微生物学分类与鉴定，确定L126为 Janthinobacterium lividum、L146为Flavobacterium hercynium、L188为 Pseudomonas gessardii，同时经验证获得菌种混合在低温污水处理中作用突显， 优于单独菌在低温污水处理中作用。
具体的，本发明提供的菌L126已保藏于布达佩斯条约微生物国际保藏单位： 中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心(CGMCC)。地址：北京市朝 阳区大屯路，中国科学院微生物研究所，邮编：100101，保藏日期是2009年3 月18日，保藏号是CGMCC No 2956。经微生物学鉴定为Janthinobacterium lividum。该耐冷菌L126，好氧、革兰氏阴性、杆状无芽孢、具运动性;菌落前 期白色，后期变成紫色，表面光滑、湿润、圆形、边缘整齐;生长温度4-35 ℃，37℃不生长，最适生长温度15℃;NaCl耐受浓度小于4%，不能耐受0.5% SDS;过氧化氢酶、氧化酶、淀粉水解阳性，酯酶反应阴性;能以葡萄糖、甘露 糖、甘露醇、苹果酸酯、柠檬酸盐、苯乙酸酯为唯一碳源生长。参照《伯杰氏 细菌鉴定手册》等对L126菌株进行形态学及生理生化测定，再经16S rDNA序列 测定与同源进化对比分析，最终确定菌L126为Janthinobacterium lividum。
本发明提供的菌L146已保藏于布达佩斯条约微生物国际保藏单位：中国微 生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心(CGMCC)。地址：北京市朝阳区大 屯路，中国科学院微生物研究所，邮编：100101，保藏日期是2009年3月18 日，保藏号是CGMCC No 2957。经微生物学鉴定为Flavobacterium hercynium。 该耐冷菌L146，好氧、革兰氏阴性、杆状无芽孢;无明显运动性;菌落呈黄色、 圆形、表面光滑、湿润、粘稠并扩展;生长温度范围12-29℃，最适生长温度20 ℃，低于7℃或高于30.5℃不能生长;在NaCl浓度为1%时生长，浓度为4%时 不生长;不能耐受0.5%SDS;过氧化氢酶、氧化酶、酯酶反应阳性;淀粉水解 阳性、能利用葡萄糖、糊精、肝糖、D-阿拉伯糖醇、D-纤维二糖、D-果糖、D- 半乳糖、D-海藻糖、L-天冬氨酸为唯一碳源。参照《伯杰氏细菌鉴定手册》等 对L146菌株进行形态学及生理生化测定，再经16S rDNA序列测定与同源进化 对比分析，最终确定菌L146为Flavobacterium hercynium。
本发明提供的菌L188已保藏于布达佩斯条约微生物国际保藏单位：中国微 生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心(CGMCC)。地址：北京市朝阳区大 屯路，中国科学院微生物研究所，邮编：100101，保藏日期是2009年3月18 日，保藏号是CGMCC No 2958。经微生物学鉴定为Pseudomonas gessardii。该 耐冷菌L188，好氧、革兰氏阴性、杆状无芽孢;具运动性;菌落呈白略带黄、 中央略凸起、圆或不规则、表面光滑湿润;生长温度范围4-37℃，40℃以上不 生长，最适生长温度20℃;1-4%NaCl浓度条件下生长，浓度为5%以上不生长; 能耐受0.5%SDS;过氧化氢酶、氧化酶反应阳性，酯酶反应阴性;淀粉水解阴 性，能利用葡萄糖、阿拉伯糖、木糖醇、果聚糖、核糖醇、赤藓糖醇为唯一碳 源。参照《伯杰氏细菌鉴定手册》等对L188菌株进行形态学及生理生化测定， 再经16S rDNA序列测定与同源进化对比分析，最终确定菌L188为Pseudomonas gessardii。
本发明菌株L126、L146、L188可采用斜面传代培养保存方式，或真空冷冻 干燥方法，或液体石腊包埋的方法进行长期的保藏。其中斜面培养方式为在适 合于菌株固体培养基上进行增殖培养，分别置于最适培养温度下、培养时间为 3～5天，待菌落形成后置于4℃下恒温保藏，3～6个月传代一次。利用真空干 燥法或液体石腊包埋法进行菌种保藏，在低温或常温下可保藏1年以上。
长期保藏的菌种在使用之前首先在适宜于L126、L146、L188菌株生长的培 养基上进行增殖培养，在本发明中选择完全培养基(蛋白胨10g，酵母浸膏5g， K2HPO4 3g，葡萄糖1g，H2O 1000ml，pH 7.0，121℃灭菌20min)，以平板划 线或涂布的方法接种于完全培养基表面，在最适培养温度下恒温培养3-5天，同 时检测是否有杂菌污染。将增殖培养的L126、L146、L188菌株单独或混合接种 于生活污水、工业废水中，本发明优选富含有机质的生活污水或工业废水，在10 -30℃下通气培养，检测培养过程中COD的变化情况。
通过实施本发明具体的发明内容，可以达到以下有益效果：
本发明定向筛选到耐冷菌：Janthinobacterium lividum CGMCC No 2956、 Flavobacterium hercynium CGMCC No 2957和Pseudomonas gessardii CGMCC No 2958，经实验证明获得菌种混合在低温污水处理中作用突显，优于单独菌在低 温污水处理中作用。