申请日2012.04.02
公开(公告)日2012.07.25
IPC分类号C12N1/20; C02F101/34; C12R1/01; C02F3/34
摘要
本发明公开了一种降解高盐度废水酚的嗜盐菌的培养及其应用方法，属于污水处理技术领域。本发明嗜盐菌首先用15～18%盐浓度的牛肉膏蛋白胨培养基对大盐湖水中的嗜盐菌进行筛选，再用苯酚液体培养基对得到的嗜盐菌进行培养，经过SBR反应器对嗜盐菌进行驯化制备而成。本发明嗜盐菌成本低，对环境适应性强，主要解决了中度嗜盐菌除高盐度废水酚耗时长的问题，具有显著的经济效益和社会效益，广阔的应用前景。
权利要求书
1.一种降解高盐度废水酚嗜盐菌的培养及其应用方法，其特征在于培养方法为:
(1) 取大盐湖水作为菌源，在盐含量为15%~18%的牛肉膏蛋白胨培养基上进行培养，用刮平板法把得到的混合物放入离心管中，以10000r/min离心分离10分钟，取上清液作为降酚中度嗜盐菌的菌源，冷藏保存;
(2)将冷藏保存的嗜盐菌菌源以1接种环500ml培养基的接种量接种到苯酚培养液中，置于全温振荡器中于37°C～39°C条件下培养36h～48h;
(3)把得到的嗜盐菌放入盐浓度为15%的采油废水中，在进水流量2L/min，pH为7.0-8.0，温度为30°C～40°C条件下，厌氧3h～4h，然后曝气6h～8h 再厌氧1.5h～4.5h ，沉淀1h～2h ，所得到的活性污泥中含有降酚嗜盐菌。
2.根据权利要求1所述的一种降解高盐度废水酚嗜盐菌的培养及其应用方法，其特征在于：所述的牛肉膏蛋白胨培养基中以质量百分比计，含有胰蛋白胨1%～3%，牛肉膏0.2%～0.5%，NaCl 7%～12%, 泻盐1%~3%，延胡索酸铁1%～3%，M-天门冬氨酸1%~3%，植物油1%~3%，琼脂1%~3%，腌制盐水 75%~85%。
3.根据权利要求1所述的一种降解高盐度废水酚嗜盐菌的培养及其应用方法，其特征在于：所述的苯酚培养液中以质量百分比计，放线菌酚 1%~ 2% ，NaCl 2%~5%，延胡索酸铁2%~ 5%，溴麝香草酚兰1%～3%，苯酚 10%~30%，腌制盐水60%~80%。
说明书
一种降解高盐度废水酚嗜盐菌的培养及其应用方法
技术领域
本发明涉及一种降解高盐度废水酚嗜盐菌的培养及其应用方法，属于污水处理领域。
背景技术
工业生产过程中会产生大量的高盐度含酚废水，如杀虫剂、灭草剂，生产的过程中使用大量的无机盐应用于工序中; 染料在精炼、漂白的工序中，石油和天然气的开采过程中等。在生产过程中虽然在源头上要求废水中污染物加以控制，但是由于一些技术上的原因，致使高盐度废水中的有机物难以处理。
高盐废水中存在的酚类物质不仅对人类健康带来严重威胁，也会给水产、水生物带来一定的毒害。当水中含酚含量在0.1～0.2毫克/升时，鱼肉即有臭味不能食用;当水中含酚含量在6.5～9.3毫克/升时，能破坏鱼的鳃和咽，使其腹腔出血、脾肿大甚至死亡。含酚浓度高于100毫克/升的废水直接灌田，会引起农作物枯死和减产。
目前，对废水中的酚类物质的处理手段主要有物理，化学，生物三种方法，物理方法主要有电解工艺、膜分离工艺、加热蒸发等。化学方法主要有电化学工艺，光催化氧化，湿式催化氧化，臭氧氧化等。生物方法有传统活性污泥工艺，微生物处理等。传统活性污泥工艺经济实用但其只在4.5%盐浓度下对去除酚类物质有良好效果，微生物处理对盐浓度有很高的要求，例如：公告号为CN101768564A、名称为“一种高效降酚嗜盐菌的制备及其应用”嗜盐菌可以处理盐浓度5%~6%的废水中的酚而不能处理6%盐浓度以上的废水中的酚，在C.R.Woolard等用中度嗜盐菌处理高盐度废水酚的实验中废水中酚的去除率可达99%，但需要7个月的时间，耗时太长。物理方法中电解工艺与加热蒸发对于盐浓度没有什么限制，耗时也不长，但耗能太高，不经济。膜分离工艺在废水中有机物浓度高时，膜易被污染，从而导致操作过程难以正常运转。况且吨级废水进行膜处理成本高，企业难以承受。化学方法中电化学工艺运行费用太高，不经济。光催化氧化，湿式催化氧化，臭氧氧化运行费用都太高，不经济而且这些方法处理含酚废水都极有可能存在着二次污染。而公告号为CN101269841、名称为“除酚用锰氧化物及其处理高浓度含酚废水的方法”所述是利用锰氧化物Mn2+在酸性环境中将酚化合物氧化降解。
本发明嗜盐菌经过筛选，培养，驯化,克服了中度嗜盐菌处理高盐度酚废水需要7个月时间，用本发明去除高盐废水酚类有机物可达99%以上，同时耗时只需8-10个小时。
发明内容
本发明主要是针对中度嗜盐菌在处理高盐度废水中酚时需要时间长，无法应用于实践，提供了一种能在实践中可应用的降解高盐度废水中酚嗜盐菌的培养方法，通过该培养方法获得的酚嗜盐菌，对含盐量为15%～18%的废水中酚的去除，只需要8～10个小时，而且酚去除率高达99%以上。
为了达到上述目的，本发明所采用的技术方案是：
(1)取大盐湖水作为菌源，在盐含量为15%的牛肉膏蛋白胨培养基中进行培养，用刮平板法把得到的混合物放入离心管中，10000r/min离心10min，取上清液作为降酚中度嗜盐菌的菌源，冷藏保存;
(2)将冷藏保存的嗜盐菌菌源以1接种环100ml培养基的接种量接种到苯酚培养液中，置于全温振荡器中于37°C～39°C条件下培养36h～48h;
(3)把得到的嗜盐菌放入盐浓度为15～18%的采油废水，在进水流量2L/min，pH为7.0-8.0，温度为30°C～40°C条件下，厌氧3h～4h,然后曝气6h～8h 再厌氧1.5h～4.5h ，沉淀1h～2h ，所得到的活性污泥中含有降酚嗜盐菌。
所述的牛肉膏蛋白胨培养基中以质量百分比计，含有胰蛋白胨1%～3%，牛肉膏0.2%～0.5%，NaCl 7%～12%, 泻盐1%~3%，延胡索酸铁1%～3%，M-天门冬氨酸1%~3%，植物油1%~3%，琼脂1%~3%,腌制盐水 75%~85%。
所述的苯酚培养液中以质量百分比计，放线菌酚 1%~ 2% ，NaCl 2%~5%，延胡索酸铁2%~ 5%，溴麝香草酚兰1%～3%，苯酚 10%~30%，,腌制盐水60%~80%。
本发明与现有方法相比所具有的优点及效果是：
(1)本发明的菌源来源广泛，对环境适应性强;
(2)本发明的嗜盐菌能在6～8小时内去除含盐量为15～18%废水中的酚。
具体实施方式
实例1
牛肉膏蛋白胨培养基中以质量计，取胰蛋白胨1g，牛肉膏 0.2g, NaCl 8.8g, 泻盐 1g, 延胡索酸铁 1g , M-天门冬氨酸 1g，植物油 1g, 琼脂 1g, 腌制盐水85g。
苯酚培养液中以质量计，取放线菌酚 10g，NaCl 20g，延胡索酸铁20g，溴麝香草酚兰10g，苯酚 240g，腌制盐水800g。
高盐度嗜盐菌的培养方法为：
取大盐湖水作为菌源，在盐含量为15%的牛肉膏蛋白胨培养基中进行培养，用刮平板法把得到的混合物放入离心管中，10000r/min离心10min。取上清液作为降酚中度嗜盐菌的菌源，冷藏保存;再将冷藏保存的嗜盐菌菌源以1接种环100ml培养基的接种量接种到苯酚培养液中，置于全温振荡器中于37℃条件下培养36h;最后把得到的嗜盐菌放入盐浓度为15%的采油废水，在进水流量2L/min，pH为7.0，温度为40℃条件下，厌氧3h,然后曝气6h，再厌氧1.5h ，沉淀2h ，所得到的活性污泥中含有降酚嗜盐菌。
实例2
牛肉膏蛋白胨培养基中以质量计，取胰蛋白胨3g，牛肉膏 0.5g, NaCl 6.5g, 泻盐 3g, 延胡索酸铁 3g , M-天门冬氨酸 3g，植物油 3g, 琼脂 3g, 腌制盐水75g。
苯酚培养液中以质量计，取放线菌酚 20g，NaCl 50g，延胡索酸铁50g，溴麝香草酚兰30g，苯酚 250g，,腌制盐水600g。
高盐度嗜盐菌的培养方法为：
取大盐湖水作为菌源，在盐含量为18%的牛肉膏蛋白胨培养基中进行培养，用刮平板法把得到的混合物放入离心管中，10000r/min离心10min。取上清液作为降酚中度嗜盐菌的菌源，冷藏保存;再将冷藏保存的嗜盐菌菌源以1接种环100ml培养基的接种量接种到苯酚培养液中，置于全温振荡器中于37℃条件下培养36h;最后把得到的嗜盐菌放入盐浓度为18%的采油废水，在进水流量2L/min，pH为8.0，温度为37℃条件下，厌氧4h,然后曝气8h，再厌氧4.5h ，沉淀2h ，所得到的活性污泥中含有降酚嗜盐菌。
实例 3
牛肉膏蛋白胨培养基中以质量计，取胰蛋白胨2g，牛肉膏 0.4g, NaCl 7.6g, 泻盐2g, 延胡索酸铁 2g , M-天门冬氨酸 2g，植物油 2g, 琼脂 2g, 腌制盐水80g。
苯酚培养液中以质量计，取放线菌酚 15g，NaCl 25g，延胡索酸铁25g，溴麝香草酚兰20g，苯酚 215g，,腌制盐水700g。
高盐度嗜盐菌的培养方法为：
取大盐湖水作为菌源，在盐含量为17%的牛肉膏蛋白胨培养基中进行培养，用刮平板法把得到的混合物放入离心管中，10000r/min离心10min。取上清液作为降酚中度嗜盐菌的菌源，冷藏保存;再将冷藏保存的嗜盐菌菌源以1接种环100ml培养基的接种量接种到苯酚培养液中，置于全温振荡器中于37℃条件下培养36h;最后把得到的嗜盐菌放入盐浓度为17%的采油废水，在进水流量2L/min，pH为7.5，温度为35℃条件下，厌氧3.5h,然后曝气7h，再厌氧3h ，沉淀2h ，所得到的活性污泥中含有降酚嗜盐菌。