糖蜜酒精废水脱色微生物筛选

发布时间:2018-3-23 10:38:39

  关于糖蜜酒精废水的生物脱色菌种方面国外有不少文献报道,如以类黑精色素为模型底物筛选获得的脱色微生物有希式乳杆菌、包氏颤蓝细菌、乳酸菌等细菌和米曲霉、丝核菌、毛云芝菌、黄孢原毛平革菌等真菌;也有直接采用烟曲霉、恶臭假单胞菌、黑曲霉等菌株对厌氧处理后的废水进行脱色。而国内对糖蜜酒精废水生物脱色的研究多为云芝菌,其他菌种报道很少。另一方面,研究者发现不同废水来源、不同生产季节、废水预处理方式都可能影响脱色效率和色值测定,如Ohmomo等报道的嗜热烟曲霉G-2-6对透析处理过的废水脱色率达到70%,对未透析处理的废水脱色率仅有40%;产乙酸菌No.BP103对废水原液和厌氧处理过的废水的脱色率差别很大,分别为32.3%±3.2%和73.5%±3.5%.由此可看出,目前所报道各种菌株的脱色能力还远未达到工业化应用的要求,特别是对于未处理的废水原液;而且不同废水来源的复杂性使得很难对不同文献报道菌株的脱色效率做出比较.因此继续筛选高效脱色微生物以丰富可供选择的菌种资源,具有重要的现实意义,而相关生物脱色的基础研究对于类似色素脱除也可起到一定借鉴作用。

  本研究从糖厂及酒精生产区域受污染的土壤中,依次以类黑精和糖蜜酒精废水为筛选模型底物分离获得1株具有较好脱色能力的丝状真菌A5P1,通过形态学和系统发育分析鉴定菌株为黄曲霉,发现其对于未处理的糖蜜酒精废水原液具有良好的脱色性能,并通过凝胶过滤色谱和酶活测定对菌株脱色糖蜜酒精废水机制进行初步探讨。具体联系污水宝或参见http://www.dowater.com更多相关技术文档。

  脱色微生物初筛

  取土样10g,加入90mL无菌水混匀后,按稀释度10-1~10-7进行梯度稀释,每个稀释度取样0.2mL涂布于含色素平板培养基上,每个稀释度涂布2个平板,放入28℃培养箱中培养,每隔2d取出观察,将有脱色圈的菌落进一步平板划线分离,挑取单菌落转接斜管保藏,细菌保藏用LB培养基,真菌用PDA培养基。

  脱色微生物复筛

  类黑精摇瓶培养基复筛将保藏的菌株转接至类黑精摇瓶培养基中(30mL装液量/150mL锥形瓶),39℃,150r·min-1振荡培养4d,取样2mL,8000r·min-1离心5min,取上清液1mL,10倍稀释后测475nm下吸光度,与未接种的空白摇瓶对照,计算脱色率.将具有脱色能力的菌株进一步转接斜管保藏备用。

  糖蜜酒精废水摇瓶培养基复筛将有脱色类黑精能力的菌株接种至糖蜜酒精废水摇瓶培养基中,培养基条件同类黑精摇瓶培养条件,具有脱色能力的菌株即为目的菌株。

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