申请日2009.05.14
公开(公告)日2009.10.14
IPC分类号C12N1/20; C02F101/38; C02F3/34; C12R1/15; C12R1/01; C12R1/38; C12R1/06; C12R1/07; C12R1/19; C02F3/30
摘要
本发明公开了一种采用生物法深度处理含有苯胺类炼油废水的菌剂及其制备方法，包括下列步骤：将好氧微生物与厌氧微生物共17株菌按体积百分含量为2%-7%的比例分别对应接入制备好的17个50-150ml液体种子培养基的三角瓶中，共同置于28-35℃的恒温振荡培养床中，振荡培养4-7天，然后将17个菌种液体种子分别对应接与17个固体扩大培养基，共同置于30-35℃温室中，培养7-11天，然后将13个好氧菌固体扩大培养物混合制得好氧微生物固体菌剂，将4个厌氧菌固体扩大培养物混合制得厌氧微生物固体菌剂;本发明采用生物法深度处理技术，其生产能耗低，可循环利用率高，降解率高，即可实现工厂化清洁连续深度处理含苯胺类炼油废水。
权利要求书
1、一种苯胺类炼油废水深度处理菌剂的制备方法，其特征在于它包括 下列步骤：
将好氧微生物与厌氧微生物共17株菌按体积百分含量为2%-7%的比例分别 对应接入制备好的17个50-150ml液体种子培养基的三角瓶中，好氧菌的液体 种子培养基三角瓶用2层10μm的透气膜封口，厌氧菌的液体种子培养基三角瓶 用三层厚封口膜封口，共同置于28-35℃的恒温振荡培养床中，振荡培养4-7天， 然后将17个菌种液体种子分别对应接与17个固体扩大培养基，好氧菌固体扩 大培养基采用3层200目纱布覆盖，厌氧菌固体扩大培养基采用2层牛皮纸覆 盖，共同置于30-35℃温室中，培养7-11天，然后将13个好氧菌固体扩大培养 物混合制得好氧微生物固体菌剂，将4个厌氧菌固体扩大培养物混合制得厌氧 微生物固体菌剂;
好氧微生物由棒杆菌属、气单胞杆菌属、假单胞杆菌属、节杆菌属、芽孢 杆菌属和微杆属组成，13个好氧菌固体扩大培养物的混合比例为：
棒杆菌属HY1(GSICC 30337)∶棒杆菌属HY4(GSICC 30336)∶棒杆菌属 HY5(GSICC 30338)∶气单胞杆菌属HY2(GSICC 30136)∶气单胞杆菌属HY3(GSICC 30137)∶假单胞杆菌属HY6(GSICC31603)∶节杆菌属B-111(GSICC30144)∶芽 孢杆菌属HY9(GSICC32824)∶芽孢杆菌属HY10(GSICC 32825)∶酚8(GSICC 32838) ∶酚13(GSICC 32821)∶酚82(GSICC 32811)∶微杆属HY7(GSICC 31301)=1-10 ∶1-10∶1-10∶1-10∶1-10∶1-10∶1-10∶1-10∶1-10∶1-7∶1-7∶1-7∶ 1-10，余量为固体扩大培养基;
厌氧微生物由肠杆菌属、假单孢菌属、芽孢杆菌属和微杆菌属组成，4个厌 氧菌固体扩大培养物的混合比例为：
肠杆菌属YY2(GSICC 30509)∶假单孢菌属YY4(GSICC 31616)∶芽孢杆菌属 YY5(GSICC 32812)∶微杆菌属YY7(GSICC 31302)=1-10∶1-10∶1-10∶1-10，余 量为固体扩大培养基;
液体种子培养基的组成及重量百分含量为：蛋白胨0.05-0.3%、酵母膏 0.1-0.3%、NaCl0.1-0.5%、蔗糖0.2-0.5%、牛肉膏0.1-0.3%、KH2PO40.01-0.04%、 MgSO40.01-0.03%、CaCl20.01-0.03%和尿素0.01-0.05%，用水定容至50-150ml， pH值为6.4-7.0;
固体扩大培养基的组成及重量百分含量为：麦芽渣70-75%、麸皮15-22%、 玉米粉2-3%、蛋白胨0.05-0.3%、酵母膏0.1-0.3%、NaCl0.1-0.5%、蔗糖 0.2-0.5%、牛肉膏0.1-0.3%、KH2PO40.01-0.04%、MgSO40.01-0.03%、 CaCl20.01-0.03%、尿素0.01-0.05%和水4.95-9.95%，pH值为6.4-7.2。
2、根据权利要求1所述制备方法制得的苯胺类炼油废水深度处理菌剂。
说明书
苯胺类炼油废水深度处理菌剂及其制备方法
技术领域
本发明涉及一种苯胺类炼油废水深度处理菌剂及其制备方法。
背景技术
炼油废水属高浓度难降解有机废水，对微生物毒性较大，可生化性差，且 废水中含油成分复杂，含盐量大，酸碱度变化大，因此处理难度极大。其中所含 的苯胺及苯胺类污染物深度处理较为困难，无法达到新排放标准要求的矛盾日 益突出。目前国内大多数炼油行业均采用物理、化学方法加以处理，但这些方 法处理能耗较高，处理中多采用强酸碱，处理后废水中残留的有机污染物难降 解，难处理，难利用，易造成水体的重复污染，在实际应用中难以推广。
生物处理方法是处理苯胺类炼油废水的最有效方法。它是利用好氧与厌氧 微生物交替作用，使苯胺及苯胺类化合物得到深度分解。由于采用生物处理方 法比物理、化学方法成本低，生产能耗低，又无二次污染，且微生物又具有很 强的恶劣环境适应性以及很高的循环利用率，因此生物处理方法已成为深度处 理苯胺类炼油废水的理想方法。
高活性的苯胺类化合物降解菌使苯胺及苯胺类化合物的深度降解得以实 现。目前许多化工厂已应用降解性微生物处理工业废水中的苯胺及苯胺类化合 物，并取得显著效果，但污染环境中化合物成分复杂，pH波动大，含盐量大， 很有可能抑制降解菌的生长或诱导其变异，致使降解菌对环境污染物降解速度 减慢，很难达到实际需要的要求，受污染环境不能有效维持降解菌的生物活性， 使降解菌菌数难以保持较高水平。
发明内容
本发明的目的在于提供一种采用生物法深度处理含有苯胺类炼油废水的菌 剂及其制备方法。
本发明苯胺类炼油废水深度处理菌剂的制备方法，包括下列步骤：
将好氧微生物与厌氧微生物共17株菌按体积百分含量为2%-7%的比例分别 对应接入制备好的17个50-150ml液体种子培养基的三角瓶中，好氧菌的液体 种子培养基三角瓶用2层10μm的透气膜封口，厌氧菌的液体种子培养基三角瓶 用三层厚封口膜封口，共同置于28-35℃的恒温振荡培养床中，振荡培养4-7天， 然后将17个菌种液体种子分别对应接与17个固体扩大培养基，好氧菌固体扩 大培养基采用3层200目纱布覆盖，厌氧菌固体扩大培养基采用2层牛皮纸覆 盖，共同置于30-35℃温室中，培养7-11天，然后将13个好氧菌固体扩大培养 物混合制得好氧微生物固体菌剂，将4个厌氧菌固体扩大培养物混合制得厌氧 微生物固体菌剂;
好氧微生物由棒杆菌属、气单胞杆菌属、假单胞杆菌属、节杆菌属、芽孢 杆菌属和微杆属组成，13个好氧菌固体扩大培养物的混合比例为：
棒杆菌属HY1(GSICC 30337)∶棒杆菌属HY4(GSICC 30336)∶棒杆菌属 HY5(GSICC 30338)∶气单胞杆菌属HY2(GSICC 30136)∶气单胞杆菌属HY3(GSICC 30137)∶假单胞杆菌属HY6(GSICC31603)∶节杆菌属B-111(GSICC30144)∶芽 孢杆菌属HY9(GSICC32824)∶芽孢杆菌属HY10(GSICC 32825)∶酚8(GSICC 32838) ∶酚13(GSICC 32821)∶酚82(GSICC 32811)∶微杆属HY7(GSICC 31301)=1-10 ∶1-10∶1-10∶1-10∶1-10∶1-10∶1-10∶1-10∶1-10∶1-7∶1-7∶1-7∶ 1-10，余量为固体扩大培养基;
厌氧微生物由肠杆菌属、假单孢菌属、芽孢杆菌属和微杆菌属组成，4个厌 氧菌固体扩大培养物的混合比例为：
肠杆菌属YY2(GSICC 30509)∶假单孢菌属YY4(GSICC 31616)∶芽孢杆菌属 YY5(GSICC 32812)∶微杆菌属YY7(GSICC 31302)=1-10∶1-10∶1-10∶1-10，余 量为固体扩大培养基，均在甘肃省工业微生物菌种保藏中心购得。
液体种子培养基的组成及重量百分含量为：蛋白胨0.05-0.3%、酵母膏 0.1-0.3%、NaCl0.1-0.5%、蔗糖0.2-0.5%、牛肉膏0.1-0.3%、KH2PO40.01-0.04%、 MgSO40.01-0.03%、CaCl20.01-0.03%和尿素0.01-0.05%，用水定容至50-150ml， pH值为6.4-7.0;
固体扩大培养基的组成及重量百分含量为：麦芽渣70-75%、麸皮15-22%、 玉米粉2-3%、蛋白胨0.05-0.3%、酵母膏0.1-0.3%、NaCl0.1-0.5%、蔗糖 0.2-0.5%、牛肉膏0.1-0.3%、KH2PO40.01-0.04%、MgSO40.01-0.03%、 CaCl20.01-0.03%、尿素0.01-0.05%和水4.95-9.95%，pH值为6.4-7.2。
用本发明方法就能制得本发明产品苯胺类炼油废水深度处理菌剂，本发明 终产品苯胺类炼油废水深度处理菌剂不需保藏。
菌剂的使用方法：将重量配比为10%-15%的好氧与厌氧固体菌剂分别装填至 好氧菌曝气筒与厌氧菌曝气筒中，然后开启好氧曝气与厌氧废水循环连续处理 装置，按0.5ml/min(装置的最大处理能力)的速度连续流加含有0-160mg/L苯 胺及苯胺化合物的炼油废水，该废水按顺序分别流经沉淀筒、营养调配筒、酸 碱度调整筒、温度平衡筒、初级曝气筒、好氧菌曝气筒、好氧菌曝气筒、酸碱 度调整筒、厌氧菌循环筒、厌氧菌循环筒、酸碱度调整筒、好氧菌曝气筒、好 氧菌曝气筒，共13个处理筒，即可连续深度处理含有苯胺类物质的炼油废水。
本发明解决了目前炼油废水处理中苯胺处理效率不高和处理后仍含有少量 苯胺类难降解污染物等问题，具有如下优点：
1.节能环保，节能环保，现有的苯胺类炼油废水处理技术，多采用物理化 学技术，其投资巨大，
同时水、电、煤以及强酸强碱的大量使用会导致二次污染，破坏生态环境。而 本发明采用生物法深度处理技术，其生产能耗低，可循环利用率高，不会对环 境造成重复污染，具有长远的生态效益。
2.本发明菌剂是通过多浓度苯胺类、硝基苯类、芳香烃类化合物和微生物 必须营养元素的引导、驯化、筛选而来，其生物活性在含苯胺类化合物较宽浓 度范围内均能达到最高。
3.本发明的菌剂是由多种好氧与厌氧微生物菌属组成，其在pH、温度、环 境上有较宽的适应性，同时制备方法简单，易于操作。
4.降解率高，采用本发明的菌剂，将其通过自制的好氧曝气与厌氧循环连 续处理装置实施在含有苯胺类炼油废水中，其降解率可达到95%-100%。
5.工厂化处理易于操作，采用本发明专利的菌剂，只须将自制好氧曝气与 厌氧循环连续处理装置按比例、原理放大，即可实现工厂化清洁连续深度处理 含苯胺类炼油废水。