申请日2010.12.20
公开(公告)日2012.07.11
IPC分类号C05F11/08; C12P1/04
摘要
本发明涉及一种利用马铃薯淀粉废水和啤酒糟为主要原料来生产木霉生防剂的方法，属于微生物农药和环境保护技术领域。木霉菌种为常规农用生防菌种如：绿色木霉(Trichodermaviride)、哈茨木霉(Trichoderma harziamum)、黄绿木霉(Trichoderma auxeoviride)等，其菌剂的生产方法包括4个步骤：种子制备、液态发酵、固态发酵，后处理技术，以马铃薯淀粉废水提供发酵培养基的主要碳源和水，以啤酒糟为微生物的载体，制备固体菌剂。本发明技术方案不仅为高浓度马铃薯淀粉废水的资源化利用提供了一条新途径，而且生产的木霉生防菌剂可用于田间施用，对多种植物真菌病害起到较好的防治作用。
权利要求书
1.利用马铃薯淀粉废水和啤酒糟生产木霉生防剂的方法，其特征在于：发酵培养基以马铃薯淀 粉废水为主要原料，生产步骤包括：
1、种子制备：木霉菌种为常规农用生防菌种如：绿色木霉(Trichoderma viride)、哈茨 木霉(Trichoderma harziamum)、黄绿木霉(Trichoderma auxeoviride)等。将马铃薯淀粉废水 于115℃-126℃灭菌15-30分钟，冷却后接种木霉菌种，接种浓度106-107个孢子/毫升培 养基，于20-35℃，摇瓶120-200转/分钟培养24-48小时，即得液态种子。
2、液态发酵：将马铃薯淀粉废水于115℃-126℃灭菌15-30分钟，接种2%-20%液 体种子，于20-35℃，发酵罐中通气好氧培养24-72小时，即得液态木霉菌产物。
3、固态发酵：以啤酒糟为支持物，将培养好的液态种子或液体木霉菌产物按照2-4倍 重量添加到啤酒糟中，搅拌均匀，于20-35℃，静态培养3-15天，即得固态木霉菌产物。
4、后处理：固态木霉菌产物以分生孢子为主，经通风干燥处理，使其含水量小于30%， 添加微生物菌肥常用稳定剂和助剂，粉碎，包装。根据地域情况也可以直接使用于农田土壤， 既能增加土壤肥力，又能改良土壤，有效防治土传病害。
说明书
利用马铃薯淀粉废水和啤酒糟生产木霉生防剂
技术领域
本发明属于微生物农药和环境保护技术领域。
技术背景
马铃薯精制淀粉，在经过不同深度的加工，可增值10-30倍左右。但是，目前的加工工 艺，每生产1吨马铃薯淀粉大约产出6-10吨高浓度有机废水，这些废水的COD值高达10000 mg/L以上，主要含有溶解性淀粉、蛋白质、果胶等，易腐败发酵，使水质发黑发臭，污染严 重。而采用一般污水处理工艺将如此高浓度的废水处理达标，能源消耗惊人。从另一个角度 考虑，马铃薯淀粉废水中的有机质(包括：溶解性淀粉、蛋白质、果胶等)是微生物生长的 良好营养底物，可以做成微生物培养基，发酵生产微生物产品。啤酒糟是生产啤酒过程中产 生的有机固体废物，富含木质纤维素和几丁质，常用堆肥的方法进行处理。
木霉菌(Trichoderma sp.)在自然界中分布广泛，是一种重要的生防菌，对多种植物真菌 病害均有较好的防治作用。木霉菌生防作用的生化机制主要包括：代谢几丁质酶、β-1，3-葡 聚糖酶、蛋白酶等多种胞外酶，强烈水解植物病原真菌的细胞壁，从而杀灭病原菌;降解真 菌细胞壁释放出诱导剂，激发植物的防御反应;代谢产生戊酮、辛酮、萜类、氨基酸衍生物、 木霉菌素、胶霉毒素、绿木霉素、抗菌肽等抗菌素类物质，抑制病原菌的生长;产生植物防 御反应的激发子，诱导植物抗病性;增强植物组织过氧化物酶、超氧化物歧化酶与过氧化氢 酶、多酚氧化酶活性，保护膜脂不被氧化;产生毒性蛋白，或以多种机制的协同拮抗作用， 抑制病原菌生长与繁殖。
文献报道的木霉菌的生产方法所采用的培养基以粮食及其副产品为主要营养物质来源。 如：中国专利(公开号：CN 1554242A)中公开了一种木霉菌的生产方法，其培养基主要是 颗粒直径在1-5毫米之间的小米、稻米、玉米、大麦、小麦或高梁。中国专利(公开号： CN 1422946A)中公开了一种木霉菌的生产方法，其生产原料主要是大麦、麸皮、莜麦等。 而以马铃薯淀粉废水和啤酒糟作为培养基来生产木霉菌的方法还未见报道。木霉菌可以分泌 纤维素酶、半纤维素酶和几丁质酶，能有效利用各种生物质。马铃薯淀粉废水中含有大量蛋 白质、果胶、淀粉等有机物，啤酒糟中含有木质纤维素和真菌菌丝体，两者可以为木霉菌生 长提供多种营养。因此，用马铃薯淀粉废水和啤酒糟来生产木霉菌不仅可以降低生产成本， 而且可以有效处理高浓度废水和有机固体废弃物。
发明内容
本发明的目的是提供一种利用马铃薯淀粉废水和啤酒糟为主要原料来生产木霉生防剂的 方法。本发明所述的木霉生防剂的生产方法如下：
1、种子制备：木霉菌种为常规农用生防菌种如：绿色木霉(Trichoderma viride)、哈茨 木霉(Trichoderma harziamum)、黄绿木霉(Trichoderma auxeoviride)等。将马铃薯淀粉废水 于115℃-126℃灭菌15-30分钟，冷却后接种木霉菌种，接种浓度106-107个孢子/毫升培 养基，于20-35℃，摇瓶120-200转/分钟培养24-48小时，即得液态种子。
2、液态发酵：将马铃薯淀粉废水于115℃-126℃灭菌15-30分钟，接种2%-20%液 体种子，于20-35℃，发酵罐中通气好氧培养24-72小时，即得液态木霉菌产物。
3、固态发酵：以啤酒糟为支持物，将培养好的液态种子或液体木霉菌产物按照2-4倍 重量添加到啤酒糟中，搅拌均匀，于20-35℃，静态培养3-15天，即得固态木霉菌产物。
4、后处理：固态木霉菌产物以分生孢子为主，经通风干燥处理，使其含水量小于30%， 添加微生物菌肥常用稳定剂和助剂，粉碎，包装。根据地域情况也可以直接使用于农田土壤， 既能增加土壤肥力，又能改良土壤，有效防治土传病害。