申请日2014.09.03
公开(公告)日2015.01.21
IPC分类号C12N1/20; C12N1/16; C12N1/14; C05F17/00; C12R1/645; C12R1/10; C12R1/23; C12R1/72; C12R1/125
摘要
本发明公开了一种污泥好氧堆肥复合菌剂的制备方法，该方法将中国工业微生物菌种保藏管理中心(CICC)保藏的枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis，编号10066)、地衣芽孢杆菌(Bacillus licheniformis，编号10103)、嗜酸乳杆菌(Lactobacillus acidophilus，编号6075)、产朊假丝酵母(Candida utilis，编号31272)、黄孢原毛平革菌(Phanerochaete chrsosporium，编号40719)，经过单独培养后按比例混合接种至发酵培养基中进行扩大培养得到复合菌剂。该复合菌剂接种于污泥好氧堆肥初期，使堆体到达高温期的时间提前4‐6天，堆肥周期缩短11‐14天，堆料含水率下降18%‐25%，堆体中总含氮量提高15%‐20%，提高了堆肥效果。
权利要求书
1.一种污泥好氧堆肥复合菌剂的制备方法，其特征在于：该方法将枯草芽孢杆菌 Bacillus subtilis，CICC保藏，编号10066、地衣芽孢杆菌Bacillus licheniformis，CICC保 藏，编号10103、嗜酸乳杆菌Lactobacillus acidophilus，CICC保藏，编号6075、产朊假丝 酵母Candida utilis，CICC保藏，编号31272、黄孢原毛平革菌Phanerochaete chrsosporium， CICC保藏，编号40719，经过单独培养后按比例混合接种至发酵培养基中进行扩大培养得 到复合菌剂。
2.根据权利要求1所述污泥好氧堆肥复合菌剂的制备方法，其特征在于：配制复合菌 剂时，将枯草芽孢杆菌、地衣芽孢杆菌、嗜酸乳杆菌、产朊假丝酵母、黄孢原毛平革菌按 顺序以菌液体积比为0.2‐1：0.2‐1：0.1‐1：0.2‐1：0.1‐1.2混合后，接种至高温灭菌后的发酵 培养基中，混合菌液用量为发酵培养基重量的4%‐12%，静置培养8‐12d，培养温度为30‐35 ℃，当总活体微生物菌数达到1×109cuf/ml以上时，完成复合菌剂的制备。
3.根据权利要求2所述污泥好氧堆肥复合菌剂的制备方法，其特征在于：所述枯草芽 孢杆菌、地衣芽孢杆菌、嗜酸乳杆菌、产朊假丝酵母、黄孢原毛平革菌按顺序优选菌液体 积比为0.8：0.5：0.5：0.6：0.2。
4.根据权利要求1或2所述污泥好氧堆肥复合菌剂的制备方法，其特征在于，所述发 酵培养基是由以下重量配比的原料混合制成：红糖15g‐25g、蛋白胨0.5g‐2g、豆饼粉1g‐3g、 磷酸二氢钾0.1g‐0.5g、氯化钙0.1g‐0.5g、硫酸铵0.5g‐1.5g、硫酸镁0.1g‐0.3g、硫酸亚铁 0.01g‐0.02g、乙酸钠0.3g‐1g、碳酸氢钠0.5g‐1.5g、蒸馏水1000ml，其pH值为7.0，发酵培 养基经121℃高温灭菌30min后冷却才使用。
5.根据权利要求1或2所述污泥好氧堆肥复合菌剂的制备方法，其特征在于，所述枯 草芽孢杆菌菌液的制备是：
挑取枯草芽孢杆菌菌种接种到固体斜面培养基，置于培养箱中培养，培养温度为35‐40 ℃，培养时间为18‐24h，然后将长出的斜面菌落接种到液体培养基中进行摇床振荡培养， 摇床转速为160r/min，培养温度为35‐40℃，培养时间为24‐48小时，当菌落数达到1× 109cuf/ml时，菌液制备完成;所述枯草芽孢杆菌固体斜面培养基是由以下重量配比的原料 混合制成：葡萄糖5g、牛肉膏1g、蛋白胨10g、氯化钠5g、琼脂15g、蒸馏水1000ml，pH 值7.0;所述液体培养基是由以下重量配比的原料混合制成：葡萄糖5g、牛肉膏1g、蛋白 胨10g、氯化钠5g、蒸馏水1000ml，pH值7.0;固体斜面培养基和液体培养基均经过121 ℃高温灭菌30min后冷却使用。
6.根据权利要求1或2所述污泥好氧堆肥复合菌剂的制备方法，其特征在于，所述地 衣芽孢杆菌菌液的制备是：
挑取地衣芽孢杆菌菌种接种到固体斜面培养基，置于培养箱中培养，培养温度为25‐30 ℃，培养时间为18‐24h，然后将长出的斜面菌落接种到液体培养基中进行摇床振荡培养， 摇床转速为160r/min，培养温度为25‐30℃，培养时间为24‐48小时，当菌落数达到1× 109cuf/ml时，菌液制备完成;所述固体斜面培养基是由以下重量配比的原料混合制成：葡 萄糖5g、牛肉膏1g、蛋白胨10g、氯化钠5g、琼脂15g、蒸馏水1000ml，pH值7.0;所述 液体培养基是由以下重量配比的原料混合制成：葡萄糖5g、牛肉膏1g、蛋白胨10g、氯化 钠5g、蒸馏水1000ml，其pH值7.0;固体斜面培养基和液体培养基均经过121℃高温灭菌 30min后冷却使用。
7.根据权利要求1或2所述污泥好氧堆肥复合菌剂的制备方法，其特征在于，所述嗜 酸乳杆菌菌液的制备是：
挑取嗜酸乳杆菌菌种接种到固体斜面培养基，置于培养箱中培养，培养温度为35‐40 ℃，培养时间为24‐36h，然后将长出的斜面菌落接种到液体培养基中进行摇床振荡培养， 摇床转速为160r/min，培养温度为35‐40℃，培养时间为48‐72小时，当菌落数达到1× 109cuf/ml时，菌液制备完成;所述嗜酸乳杆菌固体斜面培养基是由以下重量配比的原料混 合制成：葡萄糖10g、乳糖5g、牛肉膏5g、酵母提取物10g、蛋白胨10g、柠檬酸氢二铵 2g、Tween801.0g、乙酸钠5g、磷酸氢二钾2g、硫酸镁0.1g、硫酸锰0.05g、碳酸钙10g、 琼脂15g、蒸馏水1000ml，pH值5.8‐6.8;所述液体培养基是由以下重量配比的原料混合制 成：葡萄糖10g、乳糖5g、牛肉膏5g、酵母提取物10g、蛋白胨10g、柠檬酸氢二铵2g、 Tween801.0g、乙酸钠5g、磷酸氢二钾2g、硫酸镁0.1g、硫酸锰0.05g、碳酸钙10g、蒸馏 水1000ml，其pH值5.8‐6.8;固体斜面培养基和液体培养基均经过121℃高温灭菌30min 后冷却才使用。
8.根据权利要求1或2所述污泥好氧堆肥复合菌剂的制备方法，其特征在于，所述产 朊假丝酵母菌液的制备是：
挑取产朊假丝酵母菌种接种到固体斜面培养基，置于培养箱中培养，培养温度为25‐30 ℃，培养时间为16‐24h，然后将长出的斜面菌落接种到液体培养基中进行摇床振荡培养， 摇床转速为160r/min，培养温度为25‐30℃，培养时间为24‐48小时，当菌落数达到1× 109cuf/ml时，菌液制备完成;所述产朊假丝酵母固体斜面培养基是由以下重量配比的原料 混合制成：12brxi.麦芽汁1000ml、酵母提取物5g、尿素0.2g、磷酸氢二钾2g、氯化钙0.02g、 琼脂15g，其pH值为自然;所述液体培养基是由以下重量配比的原料混合制成：12brxi.麦 芽汁1000ml、酵母提取物5g、尿素0.2g、磷酸氢二钾2g、氯化钙0.02g，其pH值为自然; 固体斜面培养基和液体培养基均经过121℃高温灭菌30min后冷却使用。
9.根据权利要求1或2所述污泥好氧堆肥复合菌剂的制备方法，其特征在于，所述黄 孢原毛平革菌菌液的制备是：
挑取黄孢原毛平革菌菌种接种到固体斜面培养基，置于培养箱中培养，培养温度为 28‐32℃，培养时间为48‐56h，然后将长出的斜面菌丝接种到液体培养基中进行摇床振荡培 养，摇床转速为80r/min，培养温度为28‐32℃，培养时间为48‐72h，当菌落数达到1× 109cuf/ml时，菌液制备完成;所述黄孢原毛平革菌固体斜面培养基是由以下重量配比的原 料混合制成：马铃薯煮汁1000ml、蔗糖15g、琼脂20g，其pH值5.0‐6.0;所述液体培养基 是由以下重量配比的原料混合制成：马铃薯煮汁1000ml、蔗糖15g，其pH值5.0‐6.0;固 体斜面培养基和液体培养基均经过121℃高温灭菌30min后冷却使用。
说明书
一种污泥好氧堆肥复合菌剂的制备方法
技术领域
本发明涉及一种污泥好氧堆肥复合菌剂，特别涉及一种污泥好氧堆肥复合菌剂的制备 方法。
背景技术
随着我国城镇化进程的加快，城市污水处理量不断提高，污水处理技术已日渐成熟， 伴随而来的问题是如何处理处置污水处理厂处理污水时所产生的大量剩余污泥。目前我国 剩余污泥的处理处置方法主要有干化焚烧、卫生填埋、堆肥等。其中污泥堆肥技术通常是 与城市垃圾、畜禽粪便、秸秆、木屑、粉煤灰等辅料混合后进行好氧堆肥，是一种积极有 效的污泥资源化和无害化处理处置方式。传统的污泥堆肥法均是单纯利用堆料中土著的微 生物进行自然发酵来完成，由于堆肥初期土著微生物量少，繁殖较慢，往往容易造成堆肥 发酵周期长、产生臭味、肥效低等问题。因此，研究者们开始使用向污泥堆肥接种微生物 功能菌剂来缩短发酵周期、促进堆肥快速腐熟和提高堆肥产品质量。
如中国专利申请号为201010514582.7的说明书中公开了“利用堆肥复合菌剂进行污泥 好氧堆肥的方法”，其中复合菌剂包含同复合菌剂A和复合菌剂B，在堆肥初期接种复合菌 剂A能促进堆料中蛋白质、脂肪、淀粉等快速分解，使堆肥温度提前达到发酵高温期，在 高温期以覆盖的形式在堆体表面接种一层厚度为0.1m的复合菌种B降解纤维素和半纤维素 来达到堆肥效果，但是这种采用不同时期用不同的方式进行接种，需要把握好接种时机， 而且操作要求严格精细。
中国专利申请号为200910113229.5的说明书公开了“一种堆肥发酵复合菌剂的制备方 法”，其利用了产朊假丝酵母、植物乳酸菌、枯草芽孢杆菌三种菌种组成的复合菌种，接种 堆肥后能够强化堆肥中纤维素的降解，使降解质量提升，但是堆肥需经常翻堆，容易遭成 堆体臭气散发，氮元素损失严重，有机物丧失，且堆肥周期长达6周，肥效效果不尽理想 等。因此，污泥好氧堆肥复合菌剂的研究开发还需要进行不断的探索，以使污泥好氧堆肥 中木质纤维素快速降解，促使堆肥快速腐熟，缩短发酵周期，减少氮元素的损失从而达到 更好的堆肥处理效果。
发明内容
本发明的目的在于提供一种污泥好氧堆肥复合菌剂的制备方法，将该方法得到复合菌 剂应用于污泥好氧堆肥，可使污泥好氧堆肥中木质纤维素快速降解，促使堆肥快速腐熟， 缩短发酵周期，减少氮元素的损失从而达到更好的堆肥处理效果。
本发明以如下技术方案解决上述技术问题：
本发明污泥好氧堆肥复合菌剂的制备方法，采用中国工业微生物菌种保藏管理中心 (CICC)保藏的枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis，编号10066)、地衣芽孢杆菌(Bacillus licheniformis，编号10103)、嗜酸乳杆菌(Lactobacillus acidophilus，编号6075)、产朊假丝 酵母(Candida utilis，编号31272)、黄孢原毛平革菌(Phanerochaete chrsosporium，编号 40719)，经过单独培养后按比例混合接种至发酵培养基中进行扩大培养
本发明污泥好氧堆肥复合菌剂的制备方法，在配制复合菌剂时，将枯草芽孢杆菌、地 衣芽孢杆菌、嗜酸乳杆菌、产朊假丝酵母、黄孢原毛平革菌按顺序以菌液体积比为0.2‐1： 0.2‐1：0.1‐1：0.2‐1：0.1‐1.2混合后，接种至高温灭菌后的发酵培养基中，混合菌液用量为 发酵培养基重量的4%‐12%，静置培养8‐12d，培养温度为30‐35℃，当总活体微生物菌数达 到1×109cuf/ml以上时，完成复合菌剂的制备。
本发明污泥好氧堆肥复合菌剂的制备方法，所述枯草芽孢杆菌、地衣芽孢杆菌、嗜酸 乳杆菌、产朊假丝酵母、黄孢原毛平革菌按顺序优选菌液体积比为0.8：0.5：0.5：0.6：0.2。
本发明污泥好氧堆肥复合菌剂的制备方法，所述发酵培养基是由以下重量配比的原料 混合制成：红糖15g‐25g、蛋白胨0.5g‐2g、豆饼粉1g‐3g、磷酸二氢钾0.1g‐0.5g、氯化钙 0.1g‐0.5g、硫酸铵0.5g‐1.5g、硫酸镁0.1g‐0.3g、硫酸亚铁0.01g‐0.02g、乙酸钠0.3g‐1g、碳 酸氢钠0.5g‐1.5g、蒸馏水1000ml，其pH值为7.0，发酵培养基经121℃高温灭菌30min后 冷却才使用。
本发明污泥好氧堆肥复合菌剂的制备方法，所述枯草芽孢杆菌菌液的制备是：
挑取枯草芽孢杆菌菌种接种到固体斜面培养基，置于培养箱中培养，培养温度为35‐40 ℃，培养时间为18‐24h，然后将长出的斜面菌落接种到液体培养基中进行摇床振荡培养， 摇床转速为160r/min，培养温度为35‐40℃，培养时间为24‐48小时，当菌落数达到1× 109cuf/ml时，菌液制备完成;所述枯草芽孢杆菌固体斜面培养基是由以下重量配比的原料 混合制成：葡萄糖5g、牛肉膏1g、蛋白胨10g、氯化钠5g、琼脂15g、蒸馏水1000ml，pH 值7.0;所述液体培养基是由以下重量配比的原料混合制成：葡萄糖5g、牛肉膏1g、蛋白 胨10g、氯化钠5g、蒸馏水1000ml，pH值7.0;固体斜面培养基和液体培养基均经过121 ℃高温灭菌30min后冷却使用。
本发明污泥好氧堆肥复合菌剂的制备方法，所述地衣芽孢杆菌菌液的制备是：
挑取地衣芽孢杆菌菌种接种到固体斜面培养基，置于培养箱中培养，培养温度为25‐30 ℃，培养时间为18‐24h，然后将长出的斜面菌落接种到液体培养基中进行摇床振荡培养， 摇床转速为160r/min，培养温度为25‐30℃，培养时间为24‐48小时，当菌落数达到1× 109cuf/ml时，菌液制备完成;所述固体斜面培养基是由以下重量配比的原料混合制成：葡 萄糖5g、牛肉膏1g、蛋白胨10g、氯化钠5g、琼脂15g、蒸馏水1000ml，pH值7.0;所述 液体培养基是由以下重量配比的原料混合制成：葡萄糖5g、牛肉膏1g、蛋白胨10g、氯化 钠5g、蒸馏水1000ml，其pH值7.0;固体斜面培养基和液体培养基均经过121℃高温灭菌 30min后冷却使用。
本发明污泥好氧堆肥复合菌剂的制备方法，所述嗜酸乳杆菌菌液的制备是：
挑取嗜酸乳杆菌菌种接种到固体斜面培养基，置于培养箱中培养，培养温度为35‐40 ℃，培养时间为24‐36h，然后将长出的斜面菌落接种到液体培养基中进行摇床振荡培养， 摇床转速为160r/min，培养温度为35‐40℃，培养时间为48‐72小时，当菌落数达到1× 109cuf/ml时，菌液制备完成;所述嗜酸乳杆菌固体斜面培养基是由以下重量配比的原料混 合制成：葡萄糖10g、乳糖5g、牛肉膏5g、酵母提取物10g、蛋白胨10g、柠檬酸氢二铵 2g、Tween801.0g、乙酸钠5g、磷酸氢二钾2g、硫酸镁0.1g、硫酸锰0.05g、碳酸钙10g、 琼脂15g、蒸馏水1000ml，pH值5.8‐6.8;所述液体培养基是由以下重量配比的原料混合制 成：葡萄糖10g、乳糖5g、牛肉膏5g、酵母提取物10g、蛋白胨10g、柠檬酸氢二铵2g、 Tween801.0g、乙酸钠5g、磷酸氢二钾2g、硫酸镁0.1g、硫酸锰0.05g、碳酸钙10g、蒸 馏水1000ml，其pH值5.8‐6.8;固体斜面培养基和液体培养基均经过121℃高温灭菌30min 后冷却才使用。
本发明污泥好氧堆肥复合菌剂的制备方法，所述产朊假丝酵母菌液的制备是：
挑取产朊假丝酵母菌种接种到固体斜面培养基，置于培养箱中培养，培养温度为25‐30 ℃，培养时间为16‐24h，然后将长出的斜面菌落接种到液体培养基中进行摇床振荡培养， 摇床转速为160r/min，培养温度为25‐30℃，培养时间为24‐48小时，当菌落数达到1× 109cuf/ml时，菌液制备完成;所述产朊假丝酵母固体斜面培养基是由以下重量配比的原料 混合制成：12brxi.麦芽汁1000ml、酵母提取物5g、尿素0.2g、磷酸氢二钾2g、氯化钙0.02g、 琼脂15g，其pH值为自然;所述液体培养基是由以下重量配比的原料混合制成：12brxi.麦 芽汁1000ml、酵母提取物5g、尿素0.2g、磷酸氢二钾2g、氯化钙0.02g，其pH值为自然; 固体斜面培养基和液体培养基均经过121℃高温灭菌30min后冷却使用。
本发明污泥好氧堆肥复合菌剂的制备方法，所述黄孢原毛平革菌菌液的制备是：
挑取黄孢原毛平革菌菌种接种到固体斜面培养基，置于培养箱中培养，培养温度为 28‐32℃，培养时间为48‐56h，然后将长出的斜面菌丝接种到液体培养基中进行摇床振荡培 养，摇床转速为80r/min，培养温度为28‐32℃，培养时间为48‐72h，当菌落数达到1× 109cuf/ml时，菌液制备完成;所述黄孢原毛平革菌固体斜面培养基是由以下重量配比的原 料混合制成：马铃薯煮汁1000ml、蔗糖15g、琼脂20g，其pH值5.0‐6.0;所述液体培养基 是由以下重量配比的原料混合制成：马铃薯煮汁1000ml、蔗糖15g，其pH值5.0‐6.0;固 体斜面培养基和液体培养基均经过121℃高温灭菌30min后冷却使用。
上述涉及的酵母提取物是指标准的提取物。
本发明所用的枯草芽孢杆菌和地衣芽孢杆菌能促进堆肥中纤维素快速降解，同时地衣 芽孢杆菌能促进复合菌剂中嗜酸乳杆菌的生长繁殖;嗜酸乳杆菌能产生小分子有机酸中和 堆体中的氨气等碱性物质，减少堆体臭味;黄孢原毛平革菌产生木质素过氧化物酶、锰过 氧化物酶从而能加快木质素结构分解。因此，在污泥好氧堆肥初期接种该复合菌剂，可使 污泥好氧堆肥中木质纤维素快速降解，促使堆肥快速腐熟，缩短发酵周期，减少氮元素的 损失从而达到更好的堆肥处理效果。
本发明方法制备的复合菌剂不仅限用于污泥好氧堆肥，还可用于餐厨垃圾、畜禽粪便、 农业废弃物等堆肥。
具体实施方式
本发明方法使用中国工业微生物菌种保藏管理中心(CICC)保藏的枯草芽孢杆菌 (Bacillus subtilis，编号10066)、地衣芽孢杆菌(Bacillus licheniformis，编号10103)、嗜 酸乳杆菌(Lactobacillus acidophilus，编号6075)、产朊假丝酵母(Candida utilis，编号31272)、 黄孢原毛平革菌(Phanerochaete chrsosporium，编号40719)，经过单独培养后按比例混合 接种至发酵培养基中进行扩大培养得到复合菌剂。
所述复合菌剂中各菌种的制备方法如下：
(1)枯草芽孢杆菌菌液的制备
挑取枯草芽孢杆菌菌种接种到固体斜面培养基，置于培养箱中培养，培养温度为35‐40 ℃，培养时间为18‐24h。然后将长出的斜面菌落接种到液体培养基中进行摇床振荡培养， 摇床转速为160r/min，培养温度为35‐40℃，培养时间为24‐48小时，当菌落数达到1× 109cuf/ml时，菌液制备完成。所述枯草芽孢杆菌固体斜面培养基是由以下重量配比的原料 混合制成：葡萄糖5g、牛肉膏1g、蛋白胨10g、氯化钠5g、琼脂15g、蒸馏水1000ml，pH 值7.0;所述液体培养基为固体斜面培养基配方去琼脂。固体斜面培养基和液体培养基均经 过121℃高温灭菌30min后冷却使用。
(2)地衣芽孢杆菌菌液的制备
挑取地衣芽孢杆菌菌种接种到固体斜面培养基，置于培养箱中培养，培养温度为25‐30 ℃，培养时间为18‐24h。然后将长出的斜面菌落接种到液体培养基中进行摇床振荡培养， 摇床转速为160r/min，培养温度为25‐30℃，培养时间为24‐48小时，当菌落数达到1× 109cuf/ml时，菌液制备完成。所述地衣芽孢杆菌固体斜面培养基由以下重量配比的原料混 合制成：葡萄糖5g、牛肉膏1g、蛋白胨10g、氯化钠5g、琼脂15g、蒸馏水1000ml，pH 值7.0;所述液体培养基为固体斜面培养基配方去琼脂。固体斜面培养基和液体培养基均经 过121℃高温灭菌30min后冷却使用。
(3)嗜酸乳杆菌菌液的制备
挑取嗜酸乳杆菌菌种接种到固体斜面培养基，置于培养箱中培养，培养温度为35‐40 ℃，培养时间为24‐36h。然后将长出的斜面菌落接种到液体培养基中进行摇床振荡培养， 摇床转速为160r/min，培养温度为35‐40℃，培养时间为48‐72小时，当菌落数达到1× 109cuf/ml时，菌液制备完成。所述嗜酸乳杆菌固体斜面培养基由以下重量配比的原料混合 制成：葡萄糖10g、乳糖5g、牛肉膏5g、酵母提取物10g、蛋白胨10g、柠檬酸氢二铵2g、 Tween801.0g、乙酸钠5g、磷酸氢二钾2g、硫酸镁0.1g、硫酸锰0.05g、碳酸钙10g、琼脂 15g、蒸馏水1000ml，pH值5.8‐6.8;所述液体培养基为固体斜面培养基配方去琼脂。固体 斜面培养基和液体培养基均经过121℃高温灭菌30min后冷却才使用。
(4)产朊假丝酵母菌液的制备
挑取产朊假丝酵母菌种接种到固体斜面培养基，置于培养箱中培养，培养温度为25‐30 ℃，培养时间为16‐24h。然后将长出的斜面菌落接种到液体培养基中进行摇床振荡培养， 摇床转速为160r/min，培养温度为25‐30℃，培养时间为24‐48小时，当菌落数达到1× 109cuf/ml时，菌液制备完成。所述产朊假丝酵母固体斜面培养基由以下重量配比的原料混 合制成：12brxi.麦芽汁1000ml、酵母提取物5g、尿素0.2g、磷酸氢二钾2g、氯化钙0.02g、 琼脂15g，pH值为自然;所述液体培养基为固体斜面培养基配方去琼脂。固体斜面培养基 和液体培养基均经过121℃高温灭菌30min后冷却使用。
(5)黄孢原毛平革菌菌液的制备
挑取黄孢原毛平革菌菌种接种到固体斜面培养基，置于培养箱中培养，培养温度为 28‐32℃，培养时间为48‐56h。然后将长出的斜面菌种接种到液体培养基中进行摇床振荡培 养，摇床转速为80r/min，培养温度为28‐32℃，培养时间为48‐72h，当菌落数达到1× 109cuf/ml时，菌液制备完成。所述黄孢原毛平革菌固体斜面培养基由以下重量配比的原料 混合制成：马铃薯煮汁1000ml、蔗糖15g、琼脂20g，pH值5.0‐6.0;所述液体培养基为固 体斜面培养基配方去琼脂。固体斜面培养基和液体培养基均经过121℃高温灭菌30min后 冷却使用。
以下是本发明产品复合菌剂的制备实例：
实施例1:
将枯草芽孢杆菌、地衣芽孢杆菌、嗜酸乳杆菌、产朊假丝酵母、黄孢原毛平革菌的菌 液按体积比为0.2：0.2：0.1：0.2：0.1混合后，接种至发酵培养基中，混合菌液用量为发 酵培养基重量的12%，在30℃静置培养12d，当发酵培养基中长满菌丝时，摇匀显微计数 总微生物活体数能达到1×109cuf/ml，培养完成。所述发酵培养基配方为：红糖15g、蛋白 胨1g、豆饼粉3g、磷酸二氢钾0.1g、氯化钙0.1g、硫酸铵0.5g、硫酸镁0.1g、硫酸亚铁0.01g、 乙酸钠0.3g、碳酸氢钠0.5g、蒸馏水1000ml，发酵培养基pH值7.0。发酵培养基经121℃ 高温灭菌30min后冷却才使用。
实施例2:
将枯草芽孢杆菌、地衣芽孢杆菌、嗜酸乳杆菌、产朊假丝酵母、黄孢原毛平革菌的菌 液按体积比0.4：0.3：0.1：0.4：0.4混合后，接种至发酵培养基中，混合菌液用量为发酵 培养基重量的10%，在35℃静置培养10d，当发酵培养基中长满菌丝时，摇匀显微计数总 微生物活体数能达到1×109cuf/ml，培养完成。所述发酵培养基的配方为：红糖20g、蛋白 胨1.5g、豆饼粉2g、磷酸二氢钾0.2g、氯化钙0.2g、硫酸铵0.5g、硫酸镁0.2g、硫酸亚铁 0.02g、乙酸钠0.5g、碳酸氢钠1g、蒸馏水1000ml，发酵培养基pH值7.0。发酵培养基经 121℃高温灭菌30min后冷却才使用。
实施例3：
将枯草芽孢杆菌、地衣芽孢杆菌、嗜酸乳杆菌、产朊假丝酵母、黄孢原毛平革菌的菌 液按体积比0.8：0.5：0.5：0.6：0.2混合后，接种至发酵培养基中，混合菌液用量为发酵 培养基重量的8%，在30℃静置培养10d，当发酵培养基中长满菌丝时，摇匀显微计数总微 生物活体数能达到1×109cuf/ml，培养完成。所述发酵培养基的配方为：红糖20g、蛋白胨 1.5g、豆饼粉2g、磷酸二氢钾0.5g、氯化钙0.1g、硫酸铵1.5g、硫酸镁0.1g、硫酸亚铁0.01g、 乙酸钠0.3g、碳酸氢钠0.5g、蒸馏水1000ml，发酵培养基pH值7.0。发酵培养基经121℃ 高温灭菌30min后冷却才使用。
此实施例为最优实施例。
实施例4：
将枯草芽孢杆菌、地衣芽孢杆菌、嗜酸乳杆菌、产朊假丝酵母、黄孢原毛平革菌的菌 液按体积比0.6：1：1：0.8：1.2混合后，接种至发酵培养基中，混合菌液用量为发酵培养 基重量的8%，在30℃静置培养8d，当发酵培养基中长满菌丝时，摇匀显微计数总微生物 活体数能达到1×109cuf/ml，培养完成。所述发酵培养基的配方为：红糖20g、蛋白胨1.5、 豆饼粉3g、磷酸二氢钾0.3g、氯化钙0.3g、硫酸铵1.5g、硫酸镁0.2g、硫酸亚铁0.02g、乙 酸钠0.3g、碳酸氢钠0.5g、蒸馏水1000ml，发酵培养基pH值7.0。发酵培养基经121℃高 温灭菌30min后冷却才使用。
实施例5：
将枯草芽孢杆菌、地衣芽孢杆菌、嗜酸乳杆菌、产朊假丝酵母、黄孢原毛平革菌的菌 液按体积比1：0.8：1：1：1.2混合后，接种至发酵培养基中，混合菌液用量为发酵培养基 重量的12%，在30℃静置培养10d，当发酵培养基中长满菌丝时，摇匀显微计数总微生物 活体数能达到1×109cuf/ml，培养完成。所述发酵培养基的配方为：红糖25g、蛋白胨2g、 豆饼粉3g、磷酸二氢钾0.5g、氯化钙0.3g、硫酸铵1.5g、硫酸镁0.3g、硫酸亚铁0.02g、乙 酸钠1g、碳酸氢钠1.5g、蒸馏水1000ml，发酵培养基pH值7.0。发酵培养基经121℃高温 灭菌30min后冷却才使用。
上述实例产品复合菌剂在污泥好氧堆肥中的使用情况：
按上述实施例1‐5制备得到的复合菌剂，使用时以直接喷洒的方式按1：100‐200接入 污泥堆肥中，当堆体经过发酵升温后降温，最后温度与环境温度相同时，完成污泥好氧堆 肥。污泥堆肥前与辅料混拌均匀，调节污泥含水率为50%‐60%，堆肥的长宽高度比为 2m:1m:1m。所述辅料为城市垃圾、畜禽粪便、秸秆、木屑、粉煤灰中的两种或两种以上混 合物。经过与未接种复合菌剂的污泥好氧堆肥对比，堆体到达高温期的时间提前了4‐6天， 堆肥周期缩短了11‐14天，堆料含水率下降了18%‐25%，堆体臭气排放减少，堆料中总含 氮量提高了15%‐20%，污泥好氧堆肥得到了较好的效果。