申请日2015.03.20
公开(公告)日2015.07.01
IPC分类号C12N9/20; C12N1/20
摘要
本实验涉及一种用于处理含油脂废水的嗜热细菌生产耐高温脂肪酶的培养基。在生活或者工业生产中会产生大量的含油脂的废水，本发明的培养基，适合于处理含油脂废水的嗜热细菌的生长并生产耐高温的脂肪酶。
权利要求书
1.两种适合于处理含油脂废水的嗜热细菌生长的培养基，其特征在于，所述包括以下组分：
生长因子 胰蛋白胨 0.1g/L和
酵母提取物 0.05g/L。
在无机盐培养基中加入1%生长因子和1%微量元素，组成培养基A。
在另一优选案例中，所述培养基包括以下组分：
生长因子 胰蛋白胨 0.1g/L和
酵母提取物 0.05g/L。
在HB培养基中加入1%生长因子和1%微量元素，组成培养基B。
2.如权利要求1所述的培养基，其特征在于，所述培养基组分如下所示：
生长因子 胰蛋白胨 0.1g/L和
酵母提取物 0.05g/L。
在无机盐培养基中加入1%生长因子和1%微量元素，组成培养基A。
在另一优选案例中，所述培养基包括以下组分：
生长因子 胰蛋白胨 0.1g/L和
酵母提取物 0.05g/L。
在HB培养基中加入1%生长因子和1%微量元素，组成培养基B。
3.如权利要求1-2所述的培养基，其特征在于，所述培养基中，还含有有效量的生长因素和微量元素：较佳的，
生长因子含量为：胰蛋白胨 0.1g/L和
酵母提取物 0.05g/L。
4.如权利要求1-3任一所述培养基，其特征在于，所述培养基中，各组分配置于水中;和/或所述培养基的pH值7.0±0.5。
5.权利要求1-3任一所述培养基的用途，用于培养处理含油脂废水的嗜热细菌，生产耐高温的脂肪酶。
6.一种制备权利要求1-3任一所述的处理含油脂废水的嗜热细菌的培养基的方法，其特征在于，所述方法包括：
a)将所述胰蛋白胨、酵母提取物、磷酸氢二钾、磷酸二氢钾、氯化钠、氯化铵、硫酸镁、氯化钙、维生素母液、硫酸钙、七水合硫酸亚铁、硫酸锰、钼酸钠、硫酸铜、七水硫酸钴和硼酸用去离子水溶解混合。
b)将所述胰蛋白胨、酵母提取物、硫酸镁、氯化钙、磷酸二氢钾、磷酸氢二钾、硝酸铵、氯化铵、硝酸钠、氯化铁、硫酸钙、七水合硫酸亚铁、硫酸锰、钼酸钠、硫酸铜、七水硫酸钴和硼酸用去离子水溶解混合。
7.一种利用处理含油脂废水的嗜热细菌，生产耐高温的脂肪酶的方法，其特征在于，所述方法包括：利用权利要求1-3任一所述的培养基培养处理含油脂废水的嗜热细菌，从而生产耐高温的脂肪酶。
8.如权利要求6所述的方法，其特征在于，将处理含油脂废水的嗜热细菌按体积比3%的接种量接种入权利要求1-3任一所述的培养基，55℃，置于摇床中160rpm/min,发酵培养24h后，离心分离发酵上清液，其中含有脂肪酶。
说明书
一种用嗜热细菌处理含油脂废水生产耐高温脂肪酶的培养基
技术领域
在生活或者工业生产中会产生大量高温、含油脂的废水，本发明的培养基，适合于处理 含油脂废水的嗜热细菌的生长，且可促进耐高温脂肪酶生产。
背景技术
生活、工业生产中会产生大量的高温、含油脂废水。微生物技术治理含油脂废水，是利 用微生物的分解作用来减少水中油的浓度，消除或降低其危害程度。传统的工艺中，当含油 脂污水温度较高时，需要等待冷却才能使用常温嗜油菌处理，这就造成了效率的低下与时间 的浪费，而使用人工降温散热时，产生能源浪费。嗜热微生物俗称高温菌或嗜热菌，通常是 最低生长温度45右，最适生长温度在50～60℃最高生长温度在70℃以上的一类微生物的总称， 采用嗜热微生物直接处理含油废水并生产工业用霉，可以缩短处理时间，提高处理效益。而 筛选合适的培养基是该处理技术的重要环节。
传统的处理培养基为无机盐或HB培养基，在这些培养基中细菌处理效率和产酶效率较 低，这对该技术的实际应用造成了一定的阻碍。因此，优化培养基是首要任务。
本发明结合传统培养基中的成分，同时加入生长因子和微量元素促进细胞生长速度和代 谢活性，可以大幅度提高油脂处理效率和产酶效率。
处理含油脂废水的嗜热细菌来源于环境中的含油脂土壤，最适生长温度在55℃。在应用 方面，处理含油脂废水的嗜热细菌能够产生耐高温的脂肪酶。该种脂肪酶的活性和热稳定性 有待进一步探索。
发明内容
本发明的目的在于提供用于处理含油脂废水的嗜热细菌生产耐高温脂肪酶的培养基，其 制备方法及应用。
本发明的第一方面，提供一种处理含油脂废水的嗜热细菌的培养基，所述培养基包括以 下组分：
生长因子 胰蛋白胨 0.1g/L和
酵母提取物 0.05g/L。
在无机盐培养基中加入1%生长因子和1%微量元素，组成培养基A。 在一个优选案例中，所述细菌为处理含油脂废水的嗜热细菌。
在另一优选案例中，所述培养基包括以下组分：
生长因子 胰蛋白胨 0.1g/L和
酵母提取物 0.05g/L。
在HB培养基中加入1%生长因子和1%微量元素，组成培养基B。
在本发明的前面任一所述培养基，各组分配置于去离子水，和/或所述培养基的pH值 7.0±0.5。
在本发明的另一方面，提供前面任一所述培养基的用途，用于处理含油脂废水的嗜热细 菌，生产耐高温脂肪酶。
在本发明的另一方面，提供一种制备前面任一所述的处理含油脂废水的嗜热细菌的培养 基的方法，所述方法包括：
(a)将所述胰蛋白胨、酵母提取物、磷酸氢二钾、磷酸二氢钾、氯化钠、氯化铵、硫酸 镁、氯化钙、维生素母液、硫酸钙、七水合硫酸亚铁、硫酸锰、钼酸钠、硫酸铜、七水硫酸 钴和硼酸用去离子水溶解混合。
(b)将所述胰蛋白胨、酵母提取物、硫酸镁、氯化钙、磷酸二氢钾、磷酸氢二钾、硝酸 铵、氯化铵、硝酸钠、氯化铁、硫酸钙、七水合硫酸亚铁、硫酸锰、钼酸钠、硫酸铜、七水 硫酸钴和硼酸用去离子水溶解混合。
其中各组分的用量按照前面任一所述。
步骤(b)之后，进一步包括将pH值调至7.0±0.5，在121摄氏度灭菌2h。
在本发明的另一方面，提供一种利用处理含油脂废水的嗜热细菌生产脂肪酶的方法，所 述方法包括：利用前面任一所述的培养基，培养处理含油脂废水的嗜热细菌，从而生产能够 分解脂肪的脂肪酶。
在一个优选案例中，将处理含油脂废水的嗜热细菌按体积比3%的接种量接入前面任一所 述的培养基，55℃，置于摇床中160rpm/min,发酵培养24h后，离心分离发酵上清液，其中含 有脂肪酶。
在本发明的另一方面，提供一种用于培养处理含油脂废水的嗜热细菌的试剂盒，所属试 剂盒中包括：前面任一所述的培养基。
本发明的其他方面由于本文的公开内容，对本领域的技术人员而言是显而易见的。