申请日2018.08.15
公开(公告)日2018.12.07
IPC分类号C12N11/10; C12N11/08; C02F3/34; C12R1/125; C12R1/10; C12R1/11; C12R1/01; C12R1/645
摘要
本发明属于微生物技术领域，具体说是一种用于深度处理高浓度畜禽养殖废水的复合微生物菌剂及其制备方法。该复合微生物菌剂各组成成分及其重量份数比为：枯草芽孢杆菌、地衣芽孢杆菌、巨大芽孢杆菌、酵母菌、乳酸菌、醋酸菌、光合细菌、放线菌、硝化细菌、反硝化细菌、聚磷菌、红螺菌、脱氮硫杆菌、双歧杆菌、白地霉菌。将菌种进行固定化处理得到复合微生物菌剂。
权利要求书
1.一种用于深度处理高浓度畜禽养殖废水的复合微生物菌剂，其特征是，所述的复合微生物菌剂各组成成分及其重量份数比为：枯草芽孢杆菌20~25份、地衣芽孢杆菌20~25份、巨大芽孢杆菌8~12份、酵母菌25~30份、乳酸菌25~30份、醋酸菌18~20份、光合细菌20~25份、放线菌20~28份、硝化细菌20~30份、反硝化细菌20~30份、聚磷菌20~22份、红螺菌12~15份、脱氮硫杆菌18~23份、双歧杆菌15~20份、白地霉菌12~16份;
所述的枯草芽孢杆菌来源为含有枯草杆菌的饲料菌剂喂养小鸭子或小鸡后排出的粪便中经过分离筛选得到;
所述的地衣芽孢杆菌来源为含有地衣芽孢杆菌的饲料菌剂喂养小鸭子或小鸡后排出的粪便中经过分离筛选得到;
所述的酵母菌来源为含有地衣芽孢杆菌的饲料菌剂喂养小鸭子或小鸡后排出的粪便中经过分离筛选得到;
所述的乳酸菌来源为含有乳酸菌的饲料菌剂喂养小鸭子或小鸡后排出的粪便中经过分离筛选得到;
所述的醋酸菌来源为含有醋酸菌的饲料菌剂喂养小鸭子或小鸡后排出的粪便中经过分离筛选得到。
2.一种制备如权利要求1所述的用于深度处理高浓度畜禽养殖废水的复合微生物菌剂的方法，其特征是，包括以下步骤：
步骤1)取放线菌20~28份、硝化细菌20~30份、反硝化细菌20~30份、聚磷菌20~22份混合均匀后置于干净的20~25份土壤中再搅拌混合均匀得到含有菌种的土壤，将用无菌水清洗干净的3个月龄的健康成熟蚯蚓置于含有菌种的土壤中进行养殖，养殖时间为12~14天后分离出蚯蚓，即得到含有混合菌种的蚯蚓粪便;
步骤2)微生物菌剂载体材料制备：取硅藻土20~30份过200目筛，然后向其加入5mol/L的盐酸溶液完全浸泡，在80~85℃恒温下处理85~90min，并不断搅拌，抽滤，多次洗涤至中性，将过滤后的硅藻土在温度105℃下烘干得到干燥的硅藻土;取2~3份结晶氯化铝，加入体积浓度为15%的氢氧化钠溶液中，使得氯化铝与氢氧化铝最终摩尔比为2∶1，搅拌使之均匀，静置24h得到混合液;将干燥的硅藻土加入到混合液中，同时加入聚乙烯醇18~22份、海藻酸钙3~6份、顺丁烯二酸酐4~6份混合搅拌均匀后静置3~5h后干燥、粉碎即得到粒径大小为20~30目的微生物菌剂载体粉末;
步骤3)取制备得到的微生物菌剂载体粉末加入到无菌水中进行溶解，然后加入含有混合菌种的蚯蚓粪便、枯草芽孢杆菌20~25份、地衣芽孢杆菌20~25份、巨大芽孢杆菌8~12份、酵母菌25~30份、乳酸菌25~30份、醋酸菌18~20份、光合细菌20~25份、红螺菌12~15份、脱氮硫杆菌18~23份、双歧杆菌15~20份、白地霉菌12~16份搅拌混合均匀，得到菌体包埋液，最后加入聚乙二醇15~18份、壳聚糖26~30份凝结成球即得到复合微生物菌剂。
说明书
一种用于深度处理高浓度畜禽养殖废水的复合微生物菌剂及其制备方法
技术领域
本发明属于微生物技术领域，具体说是一种用于深度处理高浓度畜禽养殖废水的复合微生物菌剂及其制备方法。
背景技术
畜禽业是我国农业和农村经济的重要组成部分，随着我国畜禽养殖业的迅速发展，集约化、规模化养殖业迅速崛起的同时，也使畜禽养殖污染成为不容忽视的问题。规模化养殖场排放的大量粪尿与废水大多数未经妥善回收利用、处理和处置就直接排放，对环境造成严重的污染，同时也直接影响到人们的生活和身体健康。许多畜禽养殖的排污问题成为当地的主要污染源。未经处理过的畜禽废水含有大量的有机污染物以及N、P等营养物，污染负荷很高，直接排放进入江河不仅可能导致水体富营养化，还会使对有机污染物质敏感的水体生物逐渐死亡，甚至会产生恶臭，造成持久性的有机污染。畜禽废水长期渗入地下水，会使得地下水硝态氮或亚硝态氮浓度增高，溶解氧含量减少，水体有毒成分增多，导致水体恶化，高浓度畜禽废水还可能导致土壤板结、盐化，严重影响土壤质量，从而危害农作物。
为了减少畜禽废水对环境和人体健康造成的危害，对畜禽废水进行处理。畜禽废水处理技术有生态还田、物化处理、生物处理。(1)生态还田。生态还田是将畜禽养殖废水还田做肥料的方法，该方法经济有效，不仅能够使畜禽废水中的污染物达到污染物零排放的要求，还能够将废水中的营养成分循环利用于土壤-植物生态系统，减少肥料用量，实现养殖废水资源化利用。(2)物化处理。物化处理又分为：固液分离、固相吸附、化学氧化三种。固液分离是对废水中高浓度的悬浮颗粒进行筛网过滤、离心、沉淀等，能够除去其中的40%~65%的固体悬浮物，降低25%~35%的生化需氧量。固相吸附是采用具有较大吸附容量的固相材料对废水进行吸附处理，可以根据废水中污染物种类的不同选择不同的固相吸附剂，可以达到专门除去某种污染物的目的。化学氧化是利用氧化势能较高的氧化剂产生强氧化性的自由基，将水中有机物、无机物等氧化分解。(3)生物处理。生物处理是利用微生物可以利用废水中的各种营养物质为基础，通过吸收、转化、代谢等作用将污染物从水体中除去，从而降废水中的有害物质含量，达到净化水质的效果。生物处理方法操作简便、实用性强。在生物处理方面，采用单种菌很难将废水中的污染物彻底降解，而且菌群可以组合各种单种微生物降解能力形成一个完整的降解系统，集合多种酶促活性，扩大底物范围，从而能够大大提高降解活性，促进生物降。
中国专利申请号：201410387720.8，专利名称为：一种用于畜禽养殖废水处理的微生物污水处理剂。该专利公开的养殖废水微生物处理剂组成成分及其重量成分为：10-20份硝化细菌、15-30份反硝化细菌、10-50份芽孢杆菌、5-20份生物酶、5-15份乳酸菌群、10-20份酵母菌群、20-40份光合菌群，单种菌的每克培养基中均含有不低于2.0亿个活性菌。畜禽养殖废水的特性选择合适的菌种进行优化组合，各微生物在其生长过程中产生有用物质及其分泌物形成相互生长的基质和原料，并通过相互共生、增殖关系形成一个组成复杂、结构稳定、功能广泛的具有多种多样细菌的微生物群落，在畜禽养殖废水的净化过程中互惠互利，发挥其最大的联合优势，具有高效的处理效果，使得废水达标排放，且成本低廉，经济效益显著。
发明内容
本发明提供一种用于深度处理高浓度畜禽养殖废水的复合微生物菌剂及其制备方法，该复合微生物菌剂活性高，稳定性好，能够相互共生协调，多种微生物有明确的生理上的分工和协作，对难降解有机废水的处理中发挥良好的作用，对废水污染物降解性能好，使用方便，效果佳。
本发明的方案是通过这样实现的：
一种用于深度处理高浓度畜禽养殖废水的复合微生物菌剂，所述的复合微生物菌剂各组成成分及其重量份数比为：枯草芽孢杆菌20~25份、地衣芽孢杆菌20~25份、巨大芽孢杆菌8~12份、酵母菌25~30份、乳酸菌25~30份、醋酸菌18~20份、光合细菌20~25份、放线菌20~28份、硝化细菌20~30份、反硝化细菌20~30份、聚磷菌20~22份、红螺菌12~15份、脱氮硫杆菌18~23份、双歧杆菌15~20份、白地霉菌12~16份。
作为本发明的进一步改进，所述的枯草芽孢杆菌来源为含有枯草杆菌的饲料菌剂喂养小鸭子或小鸡后排出的粪便中经过分离筛选得到。
枯草芽孢杆菌获取方法为：取新鲜小鸭子或小鸡粪便5g放入含有45ml无菌水的三角瓶中，摇动片刻，然后将此瓶用小火加热至悬浊液沸腾，维持15分钟，而后静止5分钟，吸取上层液0.5ml加入到含有4.5ml的无菌水的试管中，制成1:100浓度的悬液，然后将菌液进行10倍系列稀释至10-3，然后分别吸取10-2和10-3土壤悬浊液个0.1ml滴加到含LB固体培养基平板上进行涂布，并将培养基倒置于37℃恒温培养1-2天，从上述分离的平板上分别挑取2个单菌落中部分菌体，在LB固体培养基上划线纯化，经菌落特征的观察和镜检，确定是芽孢杆菌属纯种后，挑取菌落即得到枯草芽孢杆菌。其中，枯草芽孢杆菌培养基的成分及其制备条件为：10g胰蛋白胨、10gNaCl、5g酵母提取物、15g琼脂、800ml无菌水，Ph7.0~7.4、121℃灭菌20min。
作为本发明的进一步改进，所述的地衣芽孢杆菌来源为含有地衣芽孢杆菌的饲料菌剂喂养小鸭子或小鸡后排出的粪便中经过分离筛选得到。
地衣芽孢杆菌获取方法为：取新鲜小鸭子或小鸡粪便10g放入装有无菌水的锥形瓶中，震荡锥形瓶30min，静置1min，然后将菌液进行10倍系列稀释至10-3、10-4、10-5，分别取10-5~10-3三个稀释度的稀释液0.2ml于牛肉膏蛋白胨平板进行涂布，于37℃恒温培养48h，挑取从平板中长出来的菌落即得到酵母菌。其中，牛肉膏蛋白胨培养基配方及其制备条件为：牛肉膏5g、大豆蛋白胨10g、NaCl5g、水1L、pH值7.0、0.1MPa灭菌20min。
作为本发明的进一步改进，所述的酵母菌来源为含有酵母菌的饲料菌剂喂养小鸭子或小鸡后排出的粪便中经过分离筛选得到。
酵母菌获取方法为：取新鲜小鸭子或小鸡粪便1g置于50ml富集培养基中，25℃震荡培养2d得到富集液，将富集液进行10倍系列稀释至10-3、10-4、10-5，分别取10-5~10-3三个稀释度的稀释液于分离培养基中进行涂平板，在25~28℃下培养24h，挑取从平板中长出来的菌落即得到酵母菌。其中，富集培养基配方为：20g葡萄糖，20g蛋白胨，10g酵母膏，100mg青霉素(筛选过程中排除细菌干扰)，1000mL蒸馏水;分离培养基(PDA培养基)配方为：葡萄糖20g，土豆200g，琼脂12g，蒸馏水1000mL。
作为本发明的进一步改进，所述的乳酸菌来源为含有乳酸菌的饲料菌剂喂养小鸭子或小鸡后排出的粪便中经过分离筛选得到。
乳酸菌获取方法为：取小鸭子或小鸡新鲜粪便1g，用无菌生理盐水10倍系列稀释至10-7备用;取10-7~10-5三个稀释度的稀释液各0.1ml置于平皿中，分别注入熔化并且冷却至50℃的MRS固体培养基15ml，待平板凝固后倒置平板，37℃恒温箱中培养48h，挑取长出来的菌落接种到试管斜面中保存，然后接种到MRS液体培养基中37℃24h扩大培养，待其长出菌落后进行高速离心分离，取离心后的上清液即得到乳酸菌。其中，MRS固体培养基配方为：蛋白胨2克，牛肉膏2克，酵母粉1克，柠檬酸二铵0.4克，乙酸钠1克，葡萄糖4克，吐温800.2ml，磷酸氢二钾0.4克，MgSO4·7H2O0.16克，MgSO4·4H2O0.25克，琼脂3克，蒸馏水200ml。
作为本发明的进一步改进，所述的醋酸菌来源为含有醋酸菌的饲料菌剂喂养小鸭子或小鸡后排出的粪便中经过分离筛选得到。
醋酸菌获取方法为：取新鲜的小鸭子或小鸡粪便10g加入90ml增殖培养基中，30℃恒温培养4d，然后各取1ml的增殖培养液，加入装有9ml无菌生理盐水的试管中，制成浓度梯度为10-1的菌悬液，然后逐步稀释至10-5，10-6，10-7浓度梯度，吸取10-7~10-5三个浓度梯度的稀释液各200μl，用涂布法接种于分离平板上，每个浓度梯度涂布2~3个平板，30℃恒温培养4d，挑取其中菌落长势良好，菌落分布均匀，透明圈大而清晰的全部单菌落即得到醋酸菌。其中，增殖培养基配方及制备方法为：酵母膏1%，葡萄糖1%，0.02%的结晶紫0.5%，制霉素5mg/ml，pH5.5，0.1MPa灭菌30min，待冷却到70℃时加3%(V/V)的无水乙醇;平板分离培养基配方及制备方法为：葡萄糖1%，酵母膏1%，碳酸钙2%(165℃干热灭菌30min)，无水乙醇3%，琼脂1.8%，pH自然。
一种制备用于深度处理高浓度畜禽养殖废水的复合微生物菌剂的方法，包括以下步骤：
(1)取放线菌20~28份、硝化细菌20~30份、反硝化细菌20~30份、聚磷菌20~22份混合均匀后置于干净的20~25份土壤中再搅拌混合均匀得到含有菌种的土壤，将用无菌水清洗干净的3个月龄的健康成熟蚯蚓置于含有菌种的土壤中进行养殖，养殖时间为12~14天后分离出蚯蚓，即得到含有混合菌种的蚯蚓粪便;
(2)微生物菌剂载体材料制备：取硅藻土20~30份过200目筛，然后向其加入5mol/L的盐酸溶液完全浸泡，在80~85℃恒温下处理85~90min，并不断搅拌，抽滤，多次洗涤至中性，将过滤后的硅藻土在温度105℃下烘干得到干燥的硅藻土;取2~3份结晶氯化铝，加入体积浓度为15%的氢氧化钠溶液中，使得氯化铝与氢氧化铝最终摩尔比为2∶1，搅拌使之均匀，静置24h得到混合液;将干燥的硅藻土加入到混合液中，同时加入聚乙烯醇18~22份、海藻酸钙3~6份、顺丁烯二酸酐4~6份混合搅拌均匀后静置3~5h后干燥、粉碎即得到粒径大小为20~30目的微生物菌剂载体粉末;
(3)取制备得到的微生物菌剂载体粉末加入到无菌水中进行溶解，然后加入含有混合菌种的蚯蚓粪便、枯草芽孢杆菌20~25份、地衣芽孢杆菌20~25份、巨大芽孢杆菌8~12份、酵母菌25~30份、乳酸菌25~30份、醋酸菌18~20份、光合细菌20~25份、红螺菌12~15份、脱氮硫杆菌18~23份、双歧杆菌15~20份、白地霉菌12~16份搅拌混合均匀，得到菌体包埋液，最后加入聚乙二醇15~18份、壳聚糖26~30份凝结成球即得到复合微生物菌剂。
本发明实现的技术原理是：
本发明将多种微生物进行复配制备成复合微生物菌剂，该微生物菌剂之间能够相互共生共同作用处理废水。将放线菌、硝化细菌、反硝化细菌、聚磷菌用于蚯蚓的养殖，含有放线菌、硝化细菌、反硝化细菌、聚磷菌的土壤能够经过蚯蚓体内砂囊磨碎后其表面积大大增加，有利与微生物菌种的快速转化，在蚯蚓的消化过程中蚯蚓和微生物菌剂相互依存，相互促进，既有利于蚯蚓吸收营养物质，又有利于微生物菌种的迅速增加，通过蚯蚓的消化作用后微生物菌剂结构发生一定的变化，能够形成新的群落结构同时群落结构也比较平衡稳定，适应性强，能够有效在废水中迅速作用。
将微生物菌剂制备成固定化复合微生物菌剂能够保持微生物菌种的活性，增加微生物浓度，大大提高高浓度难降解的畜禽养殖废水的处理效率，降低处理费用。在微生物菌剂固定材料的过程中对硅藻土与聚乙烯醇进行改性，提高硅藻土对菌种的固定效果，聚乙烯醇改性后可以改进其易粘连膨胀等问题，增强聚乙烯醇载体的水不溶性，并可提高其稳定性，聚乙烯醇改性后能够增强载体气体传质性能，解决在固定化反消化细菌中气体容易在载体体积内积累问题。海藻酸钙的加入有利于聚乙烯醇分子在载体中形成氢键并且促进互穿网络结构个形成，同时海藻酸钙会随着反应在凝胶网络中扩散，进一步优化载体结构有利于载体中微生物菌种的生长，进而增强了底物产物在载体内的传递，有利于微生物的生长以及降解废水的作用，此外，海藻酸钙可以增强微生物菌剂载体材料的气体渗透率。
微生物菌剂中枯草芽孢杆菌生命力顽强，代谢旺盛，能够在水体中迅速繁殖并产生大量的胞外酶，从而能够大量消耗畜禽废水中的污染物。消化细菌和反消化细菌的共同作用能够有效去除废水中的氨氮污染物，聚磷菌能够对废水中的磷物质进行有效降解。乳酸菌能够分解畜禽废水中的有机物质，从而形成有利于菌种繁殖生长的适宜环境。乳酸菌、酵母菌、放线菌、光合细菌等菌种的共同代谢作用能够有效降解畜禽废水中的各种物质。
本发明具备以下良好效果：
1.本发明根据菌株降解效率以及降解底物的差异构建出优势降解菌剂，能够对畜禽废水进行有效降解。
2.本发明制备得到的复合微生物菌剂稳定性强、活性高，微生物菌剂能够相互共生、共同作用，降解效率高。
3.本发明制备得到的复合微生物菌剂用于处理畜禽养殖废水，处理效果显著，能够有效降低畜禽养殖废水的标准，使其达到排放的相关标准，本发明的复合微生物菌剂用于处理养猪场废水，其中处理后水质pH为6.59~7.01，COD为57.61~60.34mg/L，BOD为60.84~63.54mg/L，SS为42.69~43.67 mg/L，NH4+-N为25.39~26.81mg/L，总磷浓度为24.52~26.34mg/L，处理效果好。
具体实施方式
以下结合实施例描述本发明用于深度处理高浓度畜禽养殖废水的复合微生物菌剂及其制备方法，这些描述并不是对本发明内容作进一步的限定。
实施例1
取放线菌28份、硝化细菌25份、反硝化细菌28份、聚磷菌21份混合均匀后置于干净的20份土壤中再搅拌混合均匀得到含有菌种的土壤，将用无菌水清洗干净的3个月龄的健康成熟蚯蚓置于含有菌种的土壤中进行养殖，养殖时间为12天后分离出蚯蚓，即得到含有混合菌种的蚯蚓粪便;
微生物菌剂载体材料制备：取硅藻土20份过200目筛，然后向其加入5mol/L的盐酸溶液完全浸泡，在83℃恒温下处理85min，并不断搅拌，抽滤，多次洗涤至中性，将过滤后的硅藻土在温度105℃下烘干得到干燥的硅藻土;取2.2份结晶氯化铝，加入体积浓度为15%的氢氧化钠溶液中，使得氯化铝与氢氧化铝最终摩尔比为2∶1，搅拌使之均匀，静置24h得到混合液;将干燥的硅藻土加入到混合液中，同时加入聚乙烯醇21份、海藻酸钙4份、顺丁烯二酸酐5.5份混合搅拌均匀后静置3.5h后干燥、粉碎即得到粒径大小为22目的微生物菌剂载体粉末;
取制备得到的微生物菌剂载体粉末加入到无菌水中进行溶解，然后加入含有混合菌种的蚯蚓粪便、取来源于含有枯草杆菌的饲料菌剂喂养小鸭子或小鸡后排出的粪便中经过分离筛选得到的枯草芽孢杆菌21份、取来源于含有地衣芽孢杆菌的饲料菌剂喂养小鸭子或小鸡后排出的粪便中经过分离筛选得到的地衣芽孢杆菌23份、巨大芽孢杆菌11份、取来源于含有酵母菌的饲料菌剂喂养小鸭子或小鸡后排出的粪便中经过分离筛选得到的酵母菌27份、取来源于含有乳酸菌的饲料菌剂喂养小鸭子或小鸡后排出的粪便中经过分离筛选得到的乳酸菌25份、取来源于含有醋酸菌的饲料菌剂喂养小鸭子或小鸡后排出的粪便中经过分离筛选得到的醋酸菌19.5份、光合细菌24份、红螺菌13份、脱氮硫杆菌19份、双歧杆菌16份、白地霉菌14份搅拌混合均匀，得到菌体包埋液，最后加入聚乙二醇16份、壳聚糖27份凝结成球即得到复合微生物菌剂。
实施例2
取放线菌20份、硝化细菌22份、反硝化细菌20份、聚磷菌20.5份混合均匀后置于干净的23份土壤中再搅拌混合均匀得到含有菌种的土壤，将用无菌水清洗干净的3个月龄的健康成熟蚯蚓置于含有菌种的土壤中进行养殖，养殖时间为13.5天后分离出蚯蚓，即得到含有混合菌种的蚯蚓粪便;
微生物菌剂载体材料制备：取硅藻土30份过200目筛，然后向其加入5mol/L的盐酸溶液完全浸泡，在85℃恒温下处理90min，并不断搅拌，抽滤，多次洗涤至中性，将过滤后的硅藻土在温度105℃下烘干得到干燥的硅藻土;取3份结晶氯化铝，加入体积浓度为15%的氢氧化钠溶液中，使得氯化铝与氢氧化铝最终摩尔比为2∶1，搅拌使之均匀，静置24h得到混合液;将干燥的硅藻土加入到混合液中，同时加入聚乙烯醇20份、海藻酸钙3份、顺丁烯二酸酐4.5份混合搅拌均匀后静置4h后干燥、粉碎即得到粒径大小为20目的微生物菌剂载体粉末;
取制备得到的微生物菌剂载体粉末加入到无菌水中进行溶解，然后加入含有混合菌种的蚯蚓粪便、取来源于含有枯草杆菌的饲料菌剂喂养小鸭子或小鸡后排出的粪便中经过分离筛选得到的枯草芽孢杆菌22份、取来源于含有地衣芽孢杆菌的饲料菌剂喂养小鸭子或小鸡后排出的粪便中经过分离筛选得到的地衣芽孢杆菌24份、巨大芽孢杆菌8份、取来源于含有酵母菌的饲料菌剂喂养小鸭子或小鸡后排出的粪便中经过分离筛选得到的酵母菌25份、取来源于含有乳酸菌的饲料菌剂喂养小鸭子或小鸡后排出的粪便中经过分离筛选得到的乳酸菌30份、取来源于含有醋酸菌的饲料菌剂喂养小鸭子或小鸡后排出的粪便中经过分离筛选得到的醋酸菌18份、光合细菌25份、红螺菌14份、脱氮硫杆菌23份、双歧杆菌15份、白地霉菌12份搅拌混合均匀，得到菌体包埋液，最后加入聚乙二醇15份、壳聚糖26份凝结成球即得到复合微生物菌剂。
实施例3
取放线菌22份、硝化细菌28份、反硝化细菌30份、聚磷菌22份混合均匀后置于干净的25份土壤中再搅拌混合均匀得到含有菌种的土壤，将用无菌水清洗干净的3个月龄的健康成熟蚯蚓置于含有菌种的土壤中进行养殖，养殖时间为13天后分离出蚯蚓，即得到含有混合菌种的蚯蚓粪便;
微生物菌剂载体材料制备：取硅藻土22份过200目筛，然后向其加入5mol/L的盐酸溶液完全浸泡，在80℃恒温下处理86min，并不断搅拌，抽滤，多次洗涤至中性，将过滤后的硅藻土在温度105℃下烘干得到干燥的硅藻土;取2.5份结晶氯化铝，加入体积浓度为15%的氢氧化钠溶液中，使得氯化铝与氢氧化铝最终摩尔比为2∶1，搅拌使之均匀，静置24h得到混合液;将干燥的硅藻土加入到混合液中，同时加入聚乙烯醇22份、海藻酸钙6份、顺丁烯二酸酐6份混合搅拌均匀后静置3h后干燥、粉碎即得到粒径大小为30目的微生物菌剂载体粉末;
取制备得到的微生物菌剂载体粉末加入到无菌水中进行溶解，然后加入含有混合菌种的蚯蚓粪便、取来源于含有枯草杆菌的饲料菌剂喂养小鸭子或小鸡后排出的粪便中经过分离筛选得到的枯草芽孢杆菌20份、取来源于含有地衣芽孢杆菌的饲料菌剂喂养小鸭子或小鸡后排出的粪便中经过分离筛选得到的地衣芽孢杆菌25份、巨大芽孢杆菌9份、取来源于含有酵母菌的饲料菌剂喂养小鸭子或小鸡后排出的粪便中经过分离筛选得到的酵母菌26份、取来源于含有乳酸菌的饲料菌剂喂养小鸭子或小鸡后排出的粪便中经过分离筛选得到的乳酸菌28份、取来源于含有醋酸菌的饲料菌剂喂养小鸭子或小鸡后排出的粪便中经过分离筛选得到的醋酸菌20份、光合细菌22份、红螺菌12份、脱氮硫杆菌18份、双歧杆菌20份、白地霉菌13份搅拌混合均匀，得到菌体包埋液，最后加入聚乙二醇18份、壳聚糖29份凝结成球即得到复合微生物菌剂。
实施例4
取放线菌24份、硝化细菌20份、反硝化细菌22份、聚磷菌21.5份混合均匀后置于干净的22份土壤中再搅拌混合均匀得到含有菌种的土壤，将用无菌水清洗干净的3个月龄的健康成熟蚯蚓置于含有菌种的土壤中进行养殖，养殖时间为14天后分离出蚯蚓，即得到含有混合菌种的蚯蚓粪便;
微生物菌剂载体材料制备：取硅藻土28份过200目筛，然后向其加入5mol/L的盐酸溶液完全浸泡，在84℃恒温下处理88min，并不断搅拌，抽滤，多次洗涤至中性，将过滤后的硅藻土在温度105℃下烘干得到干燥的硅藻土;取2份结晶氯化铝，加入体积浓度为15%的氢氧化钠溶液中，使得氯化铝与氢氧化铝最终摩尔比为2∶1，搅拌使之均匀，静置24h得到混合液;将干燥的硅藻土加入到混合液中，同时加入聚乙烯醇18份、海藻酸钙5份、顺丁烯二酸酐4份混合搅拌均匀后静置4.5h后干燥、粉碎即得到粒径大小为28目的微生物菌剂载体粉末;
取制备得到的微生物菌剂载体粉末加入到无菌水中进行溶解，然后加入含有混合菌种的蚯蚓粪便、取来源于含有枯草杆菌的饲料菌剂喂养小鸭子或小鸡后排出的粪便中经过分离筛选得到的枯草芽孢杆菌25份、取来源于含有地衣芽孢杆菌的饲料菌剂喂养小鸭子或小鸡后排出的粪便中经过分离筛选得到的地衣芽孢杆菌20份、巨大芽孢杆菌10份、取来源于含有酵母菌的饲料菌剂喂养小鸭子或小鸡后排出的粪便中经过分离筛选得到的酵母菌30份、取来源于含有乳酸菌的饲料菌剂喂养小鸭子或小鸡后排出的粪便中经过分离筛选得到的乳酸菌26份、取来源于含有醋酸菌的饲料菌剂喂养小鸭子或小鸡后排出的粪便中经过分离筛选得到的醋酸菌18.5份、光合细菌20份、红螺菌15份、脱氮硫杆菌20份、双歧杆菌17份、白地霉菌16份搅拌混合均匀，得到菌体包埋液，最后加入聚乙二醇17份、壳聚糖30份凝结成球即得到复合微生物菌剂。
实施例5
取放线菌26份、硝化细菌30份、反硝化细菌25份、聚磷菌20份混合均匀后置于干净的24份土壤中再搅拌混合均匀得到含有菌种的土壤，将用无菌水清洗干净的3个月龄的健康成熟蚯蚓置于含有菌种的土壤中进行养殖，养殖时间为12.5天后分离出蚯蚓，即得到含有混合菌种的蚯蚓粪便;
微生物菌剂载体材料制备：取硅藻土25份过200目筛，然后向其加入5mol/L的盐酸溶液完全浸泡，在82℃恒温下处理87min，并不断搅拌，抽滤，多次洗涤至中性，将过滤后的硅藻土在温度105℃下烘干得到干燥的硅藻土;取2.8份结晶氯化铝，加入体积浓度为15%的氢氧化钠溶液中，使得氯化铝与氢氧化铝最终摩尔比为2∶1，搅拌使之均匀，静置24h得到混合液;将干燥的硅藻土加入到混合液中，同时加入聚乙烯醇19份、海藻酸钙4份、顺丁烯二酸酐5份混合搅拌均匀后静置5h后干燥、粉碎即得到粒径大小为25目的微生物菌剂载体粉末;
取制备得到的微生物菌剂载体粉末加入到无菌水中进行溶解，然后加入含有混合菌种的蚯蚓粪便、取来源于含有枯草杆菌的饲料菌剂喂养小鸭子或小鸡后排出的粪便中经过分离筛选得到的枯草芽孢杆菌24份、取来源于含有地衣芽孢杆菌的饲料菌剂喂养小鸭子或小鸡后排出的粪便中经过分离筛选得到的地衣芽孢杆菌22份、巨大芽孢杆菌12份、取来源于含有酵母菌的饲料菌剂喂养小鸭子或小鸡后排出的粪便中经过分离筛选得到的酵母菌28份、取来源于含有乳酸菌的饲料菌剂喂养小鸭子或小鸡后排出的粪便中经过分离筛选得到的乳酸菌27份、取来源于含有醋酸菌的饲料菌剂喂养小鸭子或小鸡后排出的粪便中经过分离筛选得到的醋酸菌19份、光合细菌23份、红螺菌13份、脱氮硫杆菌22份、双歧杆菌18份、白地霉菌15份搅拌混合均匀，得到菌体包埋液，最后加入聚乙二醇16份、壳聚糖28份凝结成球即得到复合微生物菌剂。