申请日2004.08.27
公开(公告)日2005.04.13
IPC分类号C12N1/20; C02F3/34
摘要
本发明属于处理废水中芳香羧酸的微生物菌株发明及利用该菌株处理废水的用途发明，本发明包括筛选纯化降解芳香羧酸的特效菌YPC-TA2，以芳香羧酸为碳源的培养基筛选获得，为好氧菌，该菌株可降解废水中芳香羧酸，特别是苯二甲酸。本发明的特效菌降解时间短，降解效率高。
权利要求书
1、一种降解废水中芳香羧酸，特别是降解苯二甲酸的特效菌株，其特征在于：所述菌 株为YPC-TA2，pseudomonas mosselii，保藏在CGMCC，保藏编号No.1202，保藏日期2004 年8月3日。
2、按权利要求1所述的特效菌株YPC-TA2，其特征在于：从含芳香羧酸的堆场中分离 得到;该菌株适宜在温度25～35℃，PH值5.5～9条件下培养;以芳香羧酸为碳源。
3、按权利要求1或2所述的特效菌株YPC-TA2，其特征在于：从含芳香二羧酸堆场中 分离得到;该菌株适宜在35℃，PH值5.5～8条件下培养;好氧，以芳香二羧酸为碳源。
4、一种利用利用权利要求1所述特效菌YPC-TA2降解含芳香羧酸废水的方法，步骤如 下：
加入营养盐：Na2HPO4，(NH4)2SO4，调节pH为5.5～9，加水一倍，高温灭菌，按0.5g/L 的接种量接入活化的高效降解菌，室温下曝气加氧培养，经过20～25小时，即可。
5、按照权利要求4所述的特效菌YPC-TA2降解含芳香羧酸废水的方法，其特征在于： 所述芳香羧酸至少包括苯二甲酸。
6、按照权利要求4所述的特效菌YPC-TA2降解含芳香羧酸废水的方法，其特征在于： 所述芳香羧酸至少包括对苯二甲酸。
说明书
特效菌YPC-TA2及处理废水的方法
一、所属技术领域
本发明创造涉及特效微生物菌及处理化工废水的方法。
二、背景技术
对苯二甲酸(以下简称PTA)作为石油化工企业的重要产品之一，相应产生的废水排 放量也相当大，其废水中COD高达几千甚至上万。由于PTA废水中的污染物多为芳香族化 合物，同时PTA也是一种毒害性污染物，而且废水的处理难度较大，属于难生物降解的废 水。因此深入研究开发高效廉价大规模工业化降解处理PTA废水的技术及装备具有十分重 要的意义。
PTA废水中主要含有对苯二甲酸、甲基苯甲酸、对二甲苯、苯甲酸、邻苯二甲酸、间 苯二甲酸、4-羧基苯甲醛、醋酸甲酯、醋酸、乙醛、挥发酸及生产过程中是所用原料、中 间产物、副产物等40余种有机污染物质，排出的废水具有水温高、COD高、水量、水质变 化大、污染物组分复杂等特点。
现有各种处理PTA废水的技术均有一定的缺陷和不足。总的来说有的工艺复杂，构筑 物多，基建投资大，出水质量一般;有的污泥产量大，占地面积大，运行费用高。其主要的 原因之一就是处理装置中有效菌含量低，杂菌含量过高，即缺少对污水中污染物具有高效降 解作用的有效菌，尤其是针对PTA废水中具有的高效降解菌。
本发明采用微生物筛选、纯化技术，从自然环境中获得原始菌株，以芳香羧酸为碳源进 行纯化培养，获得对芳香羧酸具有高效降解作用的菌株，并测定其对COD及芳香羧酸的降 解性能。测定结果，该菌降解性能优良，对芳香羧酸废水的生物处理有很大的应用价值。
三、发明的内容
本发明目的为了提供对芳香羧酸，特别是对苯二甲酸具有高效降解作用的特效菌 YPC-TA2，所述特效菌为YPC-TA2(Pseudomonas mosselii，保藏在CGMCC，保藏编号 No.1202，保藏日期2004年8月3日)
本发明另一目的是一种利用上述特效菌YPC-TA2处理废水的方法。所述特效菌为YPC- TA2(Pseudomonas mosselii，保藏在CGMCC，保藏编号No.1202，保藏日期2004年8月3 日)。
本发明的技术构思：从自然环境中获得原始菌株样本，进行筛选培养，获得初步菌株样 本，接种后进行芳香羧酸降解性能测试，选取性能最好的为目标样本既特效菌。
以下对本发明作进一步描述：
一、菌株分离筛选方法
(一)试剂配制：
1.芳香羧酸贮备液
称取40g纯对苯二甲酸(或邻苯二甲酸、间苯二甲酸、苯甲酸)溶于1000ml蒸馏水 中，用Na2CO3调节在7.2～7.7之间。
2.富集培养液I
牛肉膏0.1g，蛋白胨0.2g，NaCl 0.2g，溶于100ml蒸馏水中。
3.富集培养液II
牛肉膏0.5g，蛋白胨0.5g，NaCl 0.2g，溶于100ml蒸馏水中。
4.筛选培养基
琼脂4g，Na2HPO40.1g，(NH4)2SO40.2g，对苯二甲酸(或邻苯二甲酸、间苯二甲酸、 苯甲酸)贮备液20ml，加蒸馏水至100ml。
5.模拟废水
Na2HPO40.05g，(NH4)2SO40.1g，对苯二甲酸(或邻苯二甲酸、间苯二甲酸、苯甲酸) 贮备液5ml，加蒸馏水至100ml。
6.富集培养基
琼脂0.6g，牛肉膏0.6g，蛋白胨0.6g，NaCl 0.4g，溶于100ml蒸馏水中。
7.保存培养基
Na2HPO40.1g，(NH4)2SO40.2g，琼脂2g，对苯二甲酸(或邻苯二甲酸、间苯二甲酸、 苯甲酸)贮备液1ml，溶于100ml蒸馏水中。
(二)筛选方法：
1、初筛
第一步 取芳香羧酸堆场上某处土壤约1g，用50ml富集培养液I室温摇床培养24小 时。
第二步 将第一步获得的菌悬液稀释至10-5～10-6，在筛选培养基上涂布，培养48小时， 进行驯化。
第三步 配制摸拟废水，测其COD，记为初始COD。
第四步 从第二步所制筛选培养基上生长的菌落中挑出18个，移入18瓶各含50ml富 集培养液II的瓶中，室温摇床培养24小时。
第五步 将第四步获得的菌悬液各取10ml，离心12min，弃上清液，将沉淀物移入模 拟废水中，在660nm波长处测定其吸光度，确定其菌体浓度。培养48小时，离心 12min，取上清液做COD，记为终了COD。
降解率=(1-终了COD/初始COD)*100计算，降解率大于80%的进行保存。
COD测定方法见GB11914-89
2、复筛
先后使用了两种方法，对初筛获得的菌株作进一步筛选与纯化。
方法一：与初筛过程基本相同，区别在于用冰箱中保存的菌株代替芳香羧酸堆场的土 壤。
方法二：取冰箱保存的菌株，从第四步开始与初筛各步骤相同。