申请日2005.07.20
公开(公告)日2006.03.29
IPC分类号C12N1/00; C02F1/52; C12N1/16; C12N1/20
摘要
本发明涉及一种处理淀粉废水的复合菌制剂及其制备方法。本发明高效絮凝处理淀粉废水的复合菌制剂的制备方法，包括下述步骤：1)菌体扩大培养;2)取淀粉废水放于锥形瓶中，加入酵母膏，用过饱和氢氧化钙溶液调pH7.5～8.0，接入1)的菌液10mL，瓶口覆盖3～4层灭菌纱布，25～30℃振荡培养24～48h;3)取淀粉废水放于量筒中，加入10%CaCl225mL，再加入2)的25mL菌液，用2mol.L-1NaOH调pH9～10，搅拌2～3min，室温放置2～3h后，虹吸除去上清液，沉淀用滤纸过滤，在80℃下烘干沉淀物。本发明絮凝效率高，淀粉废水经絮凝处理后COD降至20mg/L，pH值8.0左右，已经接近地面水(II～III类)水质;沉出物干燥后可以制备成富含蛋白质的高级饲料。
权利要求书
1.一种高效絮凝处理淀粉废水的复合菌制剂的制备方法，包括下述步骤：
1)菌体扩大培养 分别挑取多粘芽孢杆菌(Bacillus polymyxa)和啤酒酵母菌 (Saccharomymyces cerevisiae)斜面保存菌种各一环，接种于10mL LB培养 液中，(LB培养液由胰蛋白胨10g，酵母膏5g，氯化钠10g，蒸馏水1000mL， 调pH7.5，121℃灭菌20min制成)在37℃下振荡培养24～48h;将培养的菌液 5～10mL再转接入100mL新LB培养液中，37℃，振荡培养24～48h至对数生 长期(在600nm波长下，用722型分光光度计测定最大吸光值A约为1～2);
2)取淀粉废水80～90mL放于500mL的锥形瓶中，加入废水重量0.1%-0.3%的酵母 膏，用过饱和氢氧化钙溶液调pH7.5～8.0，接入1)的菌液10～20mL，瓶口覆 盖3～4层灭菌纱布，25～30℃，振荡培养24～48h;
3)取淀粉废水1000mL放于1000mL量筒中，加入10%CaCl2 25mL，再加入2)的 25mL菌液，用2mol.L-1NaOH调pH9～10，搅拌2～3min，室温放置2～3h后，虹 吸除去上清液，沉淀用滤纸过滤，或者离心除去沉淀物中的水，在80℃下烘干 沉淀物。
2.一种如权利要求1所述的高效絮凝处理淀粉废水的复合菌制剂。
说明书
高效絮凝处理淀粉废水的复合菌制剂及其制备
技术领域
本发明涉及一种处理淀粉废水的复合菌制剂及其制备方法。
背景技术
用菌液絮凝处理淀粉废水比常规的好氧-厌氧工艺处理可以节约投资成本六成以上。所 以，该项技术具有重要的应用价值和广阔的市场前景。
发明内容
本发明的目的是提供一种高效絮凝处理淀粉废水的复合菌制剂及其制备方法。
本发明所采用的技术方案是 高效絮凝处理淀粉废水的复合菌制剂的制备方法，包括下述步骤：
1)菌体扩大培养分别挑取多粘芽孢杆菌(Bacillus polymyxa)和啤酒酵母菌(Saccharomymyces cerevisiae)均购于中科院微生物所菌种保存中心斜面保存菌种各一环，接种于LB培养液 (胰蛋白胨10g，酵母膏5g，氯化钠10g，蒸馏水1000mL，调pH7.5，121℃灭菌20min) 10mL中，37℃振荡培养24h～48h;将培养的菌液5～10mL再转接入100mL新LB培养 液中，37℃振荡培养24～48h至对数生长期(在600nm波长下，用722型分光光度计测 定最大吸光值A约为1～2)。
2)取淀粉废水90mL放于500mL的锥形瓶中，加入废水重量0.1%-0.3%的酵母膏，用过饱 和氢氧化钙溶液调pH7.5～8.0，接入1)的菌液10mL，瓶口覆盖3～4层灭菌纱布，25～ 30℃振荡培养24～48h。
3)取淀粉废水1000mL放于1000mL量筒中，加入10%CaCl2 25mL，再加入2)的25mL菌 液，用2mol.L-1NaOH调pH9～10，搅拌2～3min，室温放置2～3h后，虹吸除去上清液， 沉淀用滤纸过滤，或者离心除去沉淀物中的水，在80℃下烘干沉淀物。 以及由上述方法制备的高效絮凝处理淀粉废水的复合菌制剂。
本发明的特点为
1)以安全、可靠和不易基因突变的多粘芽孢杆菌和啤酒酵母菌组成复合菌群，利用他 们的协同、共生作用，混合扩大培养后产生高效絮凝液。这两种菌具有容易培养，可 以直接利用淀粉废水中的营养成分，而且，这两种菌干燥后其菌体具有很高的营养价 值，可以与沉淀物其它成分一起制备成富含蛋白的高级饲料。
2)制备菌液絮凝剂，成本低，除0.2%～0.3%的酵母膏外，其他所用试剂仅占总成本 的1%左右。另外，用菌液絮凝处理淀粉废水比常规的好氯-厌氧工艺处理可以节约 投资成本六成以上，而且不受温度的影响，在任何季节都可以进行废水处理。所以， 该项技术具有重要的应用价值和广阔的市场前景。
本发明的有益效果：
1)絮凝效率高，以4g.L-1高龄土为对照，加入废水重量2.5%的菌液絮凝率达98%。
2)淀粉废水经絮凝处理后COD降至20mg/L，pH值8.0左右，已经接近地面水(II～III 类)水质。处理后的废水可以再用于甘薯淀粉的生产，也可以用于鱼虾的养殖，当然 更可以用于农田灌溉。不仅避免了淀粉废水对地上、地下水的污染，而且可以降低甘 薯淀粉生产成本，又挽救回大量已浪费的水资源。
3)用复合菌制剂絮凝处理淀粉废水，沉出物干燥后可以制备成富含蛋白质的高级饲料， 变废物为资源。
具体实施方式
实施例1
1)菌体扩大培养分别挑取多粘芽孢杆菌和啤酒酵母菌斜面保存菌种各一环，接种于 LB培养液(胰蛋白胨10g，酵母膏5g，氯化钠10g，蒸馏水1000mL，调pH7.5，121℃灭 菌20min)10mL中，37℃振荡培养24～36h;将培养的菌液5～10mL再转接入100mL新 LB培养液中，37℃振荡培养24～48h至对数生长期(在600nm波长下，用722型分光 光度计测定最大吸光值A约为1～2)。
2)取淀粉废水90mL放于250mL的锥形瓶中，加入废水重量0.1%～0.2%的酵母膏，用过饱 和氢氧化钙溶液调pH7.5～8.0，接入1)的菌液10mL，瓶口覆盖3～4层灭菌纱布，25～ 30℃振荡培养24h。
3)取淀粉废水90mL放于100mL量筒中，加入10%CaCl2 2.5mL，再加入2)的2.5mL菌液， 用2mol.L-1NaOH调pH9～10，搅拌2～3min，室温放置3～5h后，虹吸除去上清液，沉淀 用滤纸过滤，除去沉淀物中的水，在80℃下烘干沉淀物。干燥后称量沉淀物重0.28g.
实施例2
1)菌体扩大培养分别挑取芽孢杆菌和酵母菌斜面保存菌种各一环，接种于LB培养液(胰 蛋白胨10g，酵母膏5g，氯化钠10g，蒸馏水1000mL，调pH7.5，121℃灭菌20min)10mL 中，37℃振荡培养24～36h;将培养的菌液5～10mL再转接入100mL新LB培养液中， 37℃振荡培养24～48h至对数生长期(在600nm波长下，用722型分光光度计测定最大 吸光值A约为1～2)。
2)取淀粉废水(与实施例一相同)180mL放于1000mL的锥形瓶中，加入废水重量的0.1%～ 0.2%的酵母膏，用过饱和氢氧化钙溶液调pH7.5，接入1)的菌液20mL，瓶口覆盖3～4 层灭菌纱布，25～30℃振荡培养24h。
3)取淀粉废水(与实施例一相同)900mL放于1000mL量筒中，加入10%CaCl2 25mL，再 加入2)的25mL菌液，用2mol.L-1NaOH调pH9.5，搅拌2～3min，室温放置3h后，虹 吸除去上清液，沉淀用滤纸过滤，除去沉淀物中的水，在80℃下烘干沉淀物。干燥后 称量沉淀物重5.47g.
实施例3
1)菌体扩大培养分别挑取芽孢杆菌和酵母菌斜面保存菌种各一环，接种于LB培养液(胰 蛋白胨10g，酵母膏5g，氯化钠10g，蒸馏水1000mL，调pH7.5，121℃灭菌20min)10mL 中，37℃振荡培养36～48h;将培养的菌液5～10mL再转接入100mL新LB培养液中， 37℃振荡培养24～48h至对数生长期至对数生长期(在600nm波长下，用722型分光光 度计测定最大吸光值A约为1～2)。
2)取淀粉废水(另一批废水)270mL放于1000mL的锥形瓶中，加入废水重量0.2%～0.3% 的酵母膏，用过饱和氢氧化钙溶液调pH8.0，接入1)的菌液30mL，瓶口覆盖3～4层 灭菌纱布，25～30℃振荡培养48h。
3)取淀粉废水(另一批废水，同2))1800mL放于2000mL量筒中，加入10%CaCl2 50mL， 再加入2)的50mL菌液，用2mol.L-1NaOH调pH10，搅拌2～3min，室温放置2h后，虹 吸除去上清液，沉淀用滤纸过滤，除去沉淀物中的水，在80℃下烘干沉淀物。干燥后 称量沉淀物重10.86g。