申请日2015.11.17
公开(公告)日2016.02.24
IPC分类号C02F3/30; C12N1/20
摘要
本发明公开了一种降解焦油废水中氨氮生物制剂的制备方法，属于生物制剂领域。本发明用大豆根瘤颗粒分别和硝化菌和反硝化菌污泥混合对硝化菌培养，将培养出的硝化菌分离、提取制得生物制剂，再将含有反硝化菌的污泥培养在营养基质，将培养得到的反硝化菌菌株分离制得反硝化菌生物制剂，本发明通过硝化菌污泥和反硝化菌污泥分别进行培养菌株，再制成不同的生物制剂，硝化菌生物制剂在好养的条件可以提高对氨氮的氧化能力，反硝化菌生物制剂在厌氧的条件下可以提高对氨氮还原能力，对原本不能降解的氨氮也能有很好的降解作用，而且处理方法绿色环保，不会产生二次污染。
权利要求书
1.一种降解焦油废水中氨氮生物制剂的制备方法，其特征在于具体步骤为;
(1)取200～300g大豆根瘤放入80～90℃烘箱中干燥1～2h，干燥后放入粉碎机中粉碎，过筛筛选出50～60目颗粒，取100～150g大豆根瘤颗粒和300～400g含硝化菌的污泥搅拌混合，再取100～150g大豆根瘤颗粒和350～450g反硝化菌的污泥进行搅拌混合;
(2)分别取10～20g可溶性淀粉、50～60g葡萄糖、50～70g琼脂、50～60g酸水解干酪素进行混合，向混合物中加入2～3L的水，并搅拌直至混合物完全溶解，得到培养液，将培养液放入高温灭菌锅中在160～180℃下灭菌10～20min，灭菌后加入上述含硝化菌污泥的混合物，用质量分数30～40%的草酸调节pH值为5～6，再放在气浴恒温摇床上进行好养培养，培养温度为28～30℃，培养10～12h，对硝化菌培养;
(3)取上述培养后基质，向其中加入总质量30%的丙酮溶液，进行离心分离10～15min，得沉淀物，向沉淀物中按固液质量比1:1加入质量分数0.9%生理盐水，再进行离心分离，取上清液在旋转蒸发浓缩至原来体积的10%，即可得硝化菌生物制剂;
(4)取10～20g酵母浸膏、30～40g蛋白胨，20～25g葡萄糖，40～50g可溶性淀粉，向其中加入150～200mL的水，搅拌使其粘稠，制得培养基质，将培养基质放入高温灭菌锅中在120～140℃下灭菌10～20min，灭菌后与步骤(1)富含反硝化菌的污泥混合物混合，将其密封，并向其中通入氮气，直至完全除去氧气，在厌氧的条件下进行培养，培养温度为30～35℃，培养8～10h后得到反硝化菌菌株;
(5)将10～15g上述培养后菌株的基质，加入90～100mL质量分数0.9%无菌生理盐水，在85℃水浴中搅拌10～15min，进行稀释得悬浊液，将悬浊液均匀涂布在牛肉膏蛋白胨平板上，在25～28℃下培养20～24h，出现圆形淡黄色单菌落，挑取菌株加入到甘油中进行储存，得反硝化菌生物制剂。
说明书
一种降解焦油废水中氨氮生物制剂的制备方法
技术领域
本发明公开了一种降解焦油废水中氨氮生物制剂的制备方法，属于生物制剂领域。
背景技术
焦化废水是煤在高温炼焦、煤化工产品回收精制和煤气净化的过程中所产生的废水，其成份复杂，含有高浓度氨氮、硫化物、氰化物、氟化物等无机污染物和挥发酚及多环芳香族化合物、多种杂环如吡啶，喹啉，蒽、萘等有毒难降解的有机污染物。利用IC，ICP/MS，GC/MS等方法测出了焦化废水中几十种阴阳离子、重金属的含量，主要有F-，Cl-，Na+，K+，Ca2+，Si，Cu，Zn，Pb等，还有多达上百种有机物。由于焦化废水毒性大，难降解，会造成水体的富营养化，所以必须经过处理才能排放，又由于其高COD、高BOD、高氨氮，低C/N比，低P/N比，成分复杂，导致焦化废水极难处理。
剩余氨水是焦化废水的主要来源，占其总量的50%-70%，含有高浓度的氨氮，是焦化废水处理的重点之一。氨来源于煤中的氮。一般配煤含氮约2%，其中约60%的氮存在于焦炭中，15%～20%的氮与氢化合生成氨，其余的氮生成了氰化物、吡啶等含氮化合物。由荒煤气中冷凝下来的氨水，除补充循环氨水少量损失和初冷器后煤气带走外，其余部分即为剩余氨水，剩余氨水需经脱氨预处理，有的还经脱酚处理，然后与其它废水混合送往污水处理工序。剩余氨水中的氨主要以铵盐(NH4+)和游离氨(NH3)的形式存在，其中，铵盐由固定铵盐和挥发铵盐组成。
发明内容
本发明主要解决的技术问题：针对目前国内焦化废水处理能有效去除焦化废水中的酚、氰以及易于生物降解的污染物，但对于COD中难降解部分的某些污染物以及氨氮的处理却不是很有效，出水中的COD、BOD、氨氮等指标容易超标，特别是对氨氮几乎没有降解作用的问题，提供了一种降解焦油废水中氨氮生物制剂的制备方法，本发明用大豆根瘤颗粒分别和硝化菌和反硝化菌污泥混合对硝化菌培养，将培养出的硝化菌分离、提取制得生物制剂，再将含有反硝化菌的污泥培养在营养基质，将培养得到的反硝化菌菌株分离制得反硝化菌生物制剂，本发明通过硝化菌污泥和反硝化菌污泥分别进行培养菌株，再制成不同的生物制剂，硝化菌生物制剂在好养的条件可以提高对氨氮的氧化能力，反硝化菌生物制剂在厌氧的条件下可以提高对氨氮还原能力，对原本不能降解的氨氮也能有很好的降解作用，而且处理方法绿色环保，不会产生二次污染。
为了解决上述技术问题，本发明所采用的技术方案是：
(1)取200～300g大豆根瘤放入80～90℃烘箱中干燥1～2h，干燥后放入粉碎机中粉碎，过筛筛选出50～60目颗粒，取100～150g大豆根瘤颗粒和300～400g含硝化菌的污泥搅拌混合，再取100～150g大豆根瘤颗粒和350～450g反硝化菌的污泥进行搅拌混合;
(2)分别取10～20g可溶性淀粉、50～60g葡萄糖、50～70g琼脂、50～60g酸水解干酪素进行混合，向混合物中加入2～3L的水，并搅拌直至混合物完全溶解，得到培养液，将培养液放入高温灭菌锅中在160～180℃下灭菌10～20min，灭菌后加入上述含硝化菌污泥的混合物，用质量分数30～40%的草酸调节pH值为5～6，再放在气浴恒温摇床上进行好养培养，培养温度为28～30℃，培养10～12h，对硝化菌培养;
(3)取上述培养后基质，向其中加入总质量30%的丙酮溶液，进行离心分离10～15min，得沉淀物，向沉淀物中按固液质量比1:1加入质量分数0.9%生理盐水，再进行离心分离，取上清液在旋转蒸发浓缩至原来体积的10%，即可得硝化菌生物制剂;
(4)取10～20g酵母浸膏、30～40g蛋白胨，20～25g葡萄糖，40～50g可溶性淀粉，向其中加入150～200mL的水，搅拌使其粘稠，制得培养基质，将培养基质放入高温灭菌锅中在120～140℃下灭菌10～20min，灭菌后与步骤(1)富含反硝化菌的污泥混合物混合，将其密封，并向其中通入氮气，直至完全除去氧气，在厌氧的条件下进行培养，培养温度为30～35℃，培养8～10h后得到反硝化菌菌株;
(5)将10～15g上述培养后菌株的基质，加入90～100mL质量分数0.9%无菌生理盐水，在85℃水浴中搅拌10～15min，进行稀释得悬浊液，将悬浊液均匀涂布在牛肉膏蛋白胨平板上，在25～28℃下培养20～24h，出现圆形淡黄色单菌落，挑取菌株加入到甘油中进行储存，得反硝化菌生物制剂。
本发明的应用方法：将本发明制备出的生物制剂，对焦油废水进行处理，在好养的环境下取制得的3～5g硝化菌制剂从废水下通入进行曝气，曝气30～40min，在厌氧的环境下将4～6g反硝化菌制剂直接加入到废水中，并且密封处理，处理前焦化废水中的氨氮浓度为500～600mg/L，经过上述好养、厌氧处理后，出水氨氮浓度是多少20～30mg/L，对焦化废水中的氨氮的降解率达到95%以上。
本发明的有益效果是：
(1)本发明通过硝化菌污泥和反硝化菌污泥分别进行培养菌株，制成不同的生物制剂，硝化菌生物制剂可以在好养的条件对氨氮进行氧化，反硝化菌生物制剂在厌氧的条件下对氨氮还原，对氨氮有很好的降解作用;
(2)本发明处理方法绿色环保，不会产生二次污染。