申请日2016.03.25
公开(公告)日2016.05.18
IPC分类号C12N1/12; C02F3/32; C12R1/89
摘要
本发明公开了一种单纯利用餐饮废水培养小球藻的方法，按如下步骤制备：将当日餐饮废水先静置沉降3-4h，取上清液装入漏斗并除去浮油，再利用双层滤纸进行抽滤，去除悬浮杂质，加去离子水稀释100倍，121℃高压蒸汽灭菌冷却后，得到餐饮废水培养基;指数生长期小球藻的接种量按照10%体积比接种，放入光照培养箱中连续培养30d，培养温度为：25℃土0.1，光照强度为：1000?lx，光暗周期为：12L：12D;早晚定时摇动培养瓶两次，培养时间结束后，即得到小球藻。本发明优点在于以餐饮废水为原料，促小球藻快速生产，在相同的生长时间内，可以达到BG11培养基的生长水平，节约了小球藻的养殖成本。
摘要附图
权利要求书
1.一种单纯利用餐饮废水培养小球藻的方法，其特征在于：按如下步骤制备：
步骤1)将当日餐饮废水先静置沉降3-4h，取上清液装入漏斗并除去浮油，再利用双层滤纸进行抽滤，去除悬浮杂质后，加去离子水稀释100倍，121℃高压蒸汽灭菌冷却后，得到餐饮废水培养基;
步骤2)向锥形瓶中加入一定体积的餐饮废水培养基，并将指数生长期小球藻接种到餐饮废水培养基中，所述的指数生长期小球藻的接种量按照10%体积比接种，用锡箔纸封住瓶口，放入光照培养箱中连续培养30d，培养温度为：25℃土0.1，光照强度为：1000lx，光暗周期为：12L：12D;
步骤3)每天早晚定时摇动培养瓶两次，防止小球藻下沉或贴壁，并且随机调换培养锥形瓶在培养箱中的位置，培养时间结束后，即得到小球藻。
2.根据权利要求1所述的一种单纯利用餐饮废水培养小球藻的方法，其特征在于：所述的指数生长期小球藻是指经过BG11培养基保种培养，并扩大培养成为指数生长期细胞，密度为1*10^6个/mL的小球藻。
说明书
一种单纯利用餐饮废水培养小球藻的方法
技术领域
本发明涉及一种小球藻的培养方法，具体涉及一种单纯利用餐饮废水培养小球藻的方法。
背景技术
小球藻为绿藻门小球藻属普生性单细胞绿藻，是一种高效的光合植物，以光合自养生长繁殖，分布极广。细胞内含有丰富的蛋白质、维生素、矿物质、食物纤维、核酸及叶绿素等，是维持和促进人体健康所不可缺少的营养素，随着生物技术的迅速发展，小球藻也得到了广泛的应用。
随着人类社会和科学研究的迅猛发展，在全世界范围内越来越意识到可持续发展的重要性。在可再生资源利用方面，人们在努力提高资源利用效率的同时，都在尽量减少对环境的影响。这已经成为很多行业的共识。化石能源由古生物化石沉积而来，其化学成份是碳氢化合物及其衍生物。目前，化石能源是当代人类社会经济发展的血液，其年均消耗量达到全世界初级能源消耗量的90%，是全球消耗的最主要能源。但是，化石能源又属于不可再生资源，在二十世纪70年代以来，人们便一直在探索新的能源替代物，尤其是环境友好的可再生资源。生物质能是太阳能以化学能形式贮存在生物质中的能量形式，即以生物质为载体的能量，可转化为常规的固态、液态和气态燃料，是一种可再生能源，同时也是目前为止能够实用的唯一可再生的碳源。生物质能具有可再生性、低污染性、广泛分布性、燃料总量丰富等特点。生物质能产业不仅可提供能量，而且由于利用微藻等高效率生物通过光合作用大量利用CO2，因而可减轻全球温室效应。微藻生物质具有产量大和可再生等优点，可发展为重要的新能源。同时，微藻在治理污染方面也发挥重要作用。
小球藻是最好的太阳能转换器之一，其分裂速度快、生长迅速，油脂含量高、组成接近于生物柴油，可在生物反应器中生长不占用耕地，可以利用工农业和生活废水生长，正是具有这样一系列的优势,小球藻成为了生物质能源研究的重点领域，是人们最感兴趣的能源生物转换系统。现在，美国、日本、以色列、中国台湾等国家和地区已成为小球藻的主产地。但小球藻的产量仍旧无法满足当前的需求。随着生物质能源产业的发展，对小球藻的需求会日益增加。小球藻的高油脂含量，使得其成为生产生物柴油的重要原料。小球藻作为一种新型油脂原料，具有很高的应用价值和市场前景，但其生产方面还有很多问题也解决，特别是生产成本问题。小球藻生物质能源亟需有效的开发和利用。
发明内容
为了克服上述现有技术的不足，本发明提供了一种低成本的小球藻培养的新方法，其中除了由当日餐饮废水配制成的餐饮废水培养基，不需要添加任何其他成分，相比现有技术培养小球藻的培养基，极大地节约了小球藻养殖成本。
本发明是通过如下技术方案实现的，一种单纯利用餐饮废水培养小球藻的方法，按如下步骤制备：
步骤1)将当日餐饮废水先静置沉降3-4h，取上清液装入漏斗并除去浮油，再利用双层滤纸进行抽滤，去除悬浮杂质后，加去离子水稀释100倍，121℃高压蒸汽灭菌冷却后，得到餐饮废水培养基;
步骤2)向锥形瓶中加入一定体积的餐饮废水培养基，并将指数生长期小球藻接种到餐饮废水培养基中，所述的指数生长期小球藻的接种量按照10%体积比接种，用锡箔纸封住瓶口，放入光照培养箱中连续培养30d，培养温度为：25℃土0.1，光照强度为：1000lx，光暗周期为：12L：12D;
步骤3)每天早晚定时摇动培养瓶两次，防止小球藻下沉或贴壁，并且随机调换培养锥形瓶在培养箱中的位置，培养时间结束后，即得到小球藻。
所述的指数生长期小球藻是指经过BG11培养基保种培养，并扩大培养成为指数生长期细胞，密度为1*10^6个/mL的小球藻。
所述的BG11培养基的配制方法：是将微量元素A5溶液加入BG11培养基液中，其微量元素A5溶液的加入量是BG11培养基液体积的千分之一;
所述的BG11培养基液
NaNO31.5(g/L)K2HPO4·3H2O0.0524(g/L)
MgSO4·7H2O0.075(g/L)CaCL20.0272(g/L)
柠檬酸·H2O0.006562(g/L)柠檬酸铁铵0.006(g/L)
EDTA-Na2·2H2O0.011(g/L)NaCO30.02(g/L)
加蒸馏水定容至1L，分装、灭菌;
所述的微量元素A5溶液(1000×)(1mL/L)：
MnCL2·4H2O1.86(g/L)H3BO32.86(g/L)
Na2MO4·2H2O0.39(g/L)ZnSO4·H2O0.22(g/L)
CuSO4·5H2O0.008(g/L)Co(NO3)2·6H2O0.05(g/L)
加蒸馏水定容至1L，分装后高温灭菌。
本发明有益效果：本发明可以促小球藻快速生产，在相同的生长时间内，生长情况达到BG11培养基的生长水平，这既消除了餐饮废物对环境的污染又充分利用了其中的有机质，其生产原料量大，容易获得，处理方法简单，极大地节约了生产成本，使低成本工业化快速培养小球藻成为可能。