申请日2017.07.06
公开(公告)日2017.10.17
IPC分类号C12N1/12; C12N1/20; C12N1/14; C02F3/34; C02F3/32; C12R1/89; C12R1/125; C12R1/685; C02F101/34
摘要
本发明属于微生物技术领域，公开了一种用于修复羟甲基纤维素废水的微生物制剂，其由如下原料组成：多变鱼腥藻驯化液、产黄纤维单胞菌驯化液、枯草芽孢杆菌驯化液、黑曲霉驯化液;所述多变鱼腥藻液、产黄纤维单胞菌驯化液、枯草芽孢杆菌驯化液以及黑曲霉驯化液分开使用。本发明微生物制剂采用四种微生物，配伍合理，协同性能好，能够促进微生物增殖以及酶活力，修复羟甲基纤维素废水效果好。
权利要求书
1.一种用于修复羟甲基纤维素废水的微生物制剂，其由如下原料组成：多变鱼腥藻驯化液、产黄纤维单胞菌驯化液、枯草芽孢杆菌驯化液、黑曲霉驯化液;所述多变鱼腥藻液、产黄纤维单胞菌驯化液、枯草芽孢杆菌驯化液以及黑曲霉驯化液分开使用。
2.根据权利要求1所述的微生物制剂，其特征在于，所述多变鱼腥藻驯化液按照如下工艺制备而得：
1)取羟甲基纤维素废水，往废水中添加尿素0.5g、碳酸氢钠6g、磷酸氢二钾0.2g、磷酸二氢钾0.2g、氯化钠0.3g、氯化钾0.3g、柠檬酸铁铵0.03g、乙二胺四乙酸二钠0.03g，搅拌均匀，定容至1L，制得藻类驯化培养基;
2)将多变鱼腥藻按照常规培养获得种子液，然后按照1:10的体积比转入藻类驯化培养基，培养12小时，得到多变鱼腥藻驯化液。
3.根据权利要求1所述的微生物制剂，其特征在于，所述产黄纤维单胞菌驯化液、按照如下工艺制备而得：
1)取羟甲基纤维素废水，往废水中添加葡萄糖30-40g，酵母粉15-20g，磷酸二氢钾2-3g，磷酸氢二钾2-3g，硫酸镁2-3g，碳酸钙1-2g，硫酸亚铁1-2g，搅拌均匀，定容至1L，制得菌株驯化培养基;
2)将产黄纤维单胞菌按照常规培养获得种子液，再按照1:10的体积比转入菌株驯化培养基，培养12-16小时，得到产黄纤维单胞菌驯化培养液。
4.根据权利要求1所述的微生物制剂，其特征在于，所述枯草芽孢杆菌驯化液按照如下工艺制备而得：
1) 取羟甲基纤维素废水，往废水中添加葡萄糖30-40g，酵母粉15-20g，磷酸二氢钾2-3g，磷酸氢二钾2-3g，硫酸镁2-3g，碳酸钙1-2g，硫酸亚铁1-2g，搅拌均匀，定容至1L，制得菌株驯化培养基;
2)将枯草芽孢杆菌按照常规培养获得种子液，再按照1:15的体积比转入菌株驯化培养基，培养18-24小时，得到枯草芽孢杆菌驯化培养液。
5.根据权利要求1所述的微生物制剂，其特征在于，所述黑曲霉驯化液按照如下工艺制备而得：
1) 取羟甲基纤维素废水，往废水中添加葡萄糖30-40g，酵母粉15-20g，磷酸二氢钾2-3g，磷酸氢二钾2-3g，硫酸镁2-3g，碳酸钙1-2g，硫酸亚铁1-2g，搅拌均匀，定容至1L，制得菌株驯化培养基;
2)将黑曲霉按照常规培养获得种子液，再按照1:10的体积比转入菌株驯化培养基，培养18-24小时，得到黑曲霉驯化培养液。
6.上述任一权利要求所述的微生物制剂在修复羟基甲纤维素废水中的应用。
说明书
一种用于修复羟甲基纤维素废水的微生物制剂及其制备方法
技术领域
本发明属于微生物技术领域，具体涉及一种用于修复羟甲基纤维素废水的微生物制剂及其制备方法。
背景技术
羧甲基纤维素(CMC)是一种纤维素衍生物，属阴离子型纤维素醚类，外观为白色或微黄色絮状纤维粉末或白色粉末，无臭无味，无毒;易溶于冷水或热水，形成具有一定粘度的透明溶液。溶液为中性或微碱性，不溶于乙醇、乙醚、异丙醇、丙酮等有机溶剂，可溶于含水60%的乙醇或丙酮溶液。有吸湿性，对光热稳定，粘度随温度升高而降低，溶液在PH值2～10稳定，PH低于2，有固体析出，PH值高于10粘度降低。变色温度227℃，炭化温度252℃，2%水溶液表面张力71mn/n。CMC可作为粘合剂 、增稠剂、悬浮剂、乳化剂、分散剂、稳定剂、上浆剂等。羧甲基纤维素钠(CMC)是纤维素醚类中产量最大的、用途最广、使用最为方便的产品，俗称为"工业味精"。在食品工业中被用作增稠剂及乳化剂,在日化工业中被用作稳泡剂及分散剂，在医药工业中被用作塑性剂及缓释剂等，在石油工业中被用作保水剂和稳定剂等。CMC 生产废水是典型的高浓度有机废水，既含有纤维素、羧甲基纤维素钠等大分子物质，又含有羟乙酸钠、氯乙酸、乙醇、乙醇钠以及无机盐等小分子物质，COD、氨氮含量较高，为难处理高浓度工业废水。若未经处理直接排放将会直接导致江河水质矿化度提高,给土壤、地表水、地下水带来严重的污染，使水体缺氧甚至是厌氧，导致鱼类及其他生物大量死亡。
目前处理羟甲基纤维素废水的方法有较多，包括微电解法、紫外线氯化法、双氧水处理法、生物技术法等，但是均不能够实现废水有效利用，变废为宝。例如，现有技术“铁炭微电解法预处理羧甲基纤维素生产废水“采用微电解法处理生产废水，能够大幅降低废水中的污染物含量，但是经过处理后的废水仍然达不到排放标准，无法实现对废水进行资源化处理。生化技术法环境友好性好，能够对废水进行深度修复，缺点效率较低，菌株选择困难。开发一种用于修复羟甲基纤维素废水的高效微生物制剂是我们需要解决的技术问题。
发明内容
为了克服现有技术微生物种类选择困难、处理效果差的缺陷，本发明提供了一种用于修复羟甲基纤维素废水的微生物制剂。本发明还提供了上述微生物制剂的制备方法。
本发明是采用如下技术方案实现的：
一种用于修复羟甲基纤维素废水的微生物制剂，其由如下原料组成：多变鱼腥藻驯化液、产黄纤维单胞菌驯化液、枯草芽孢杆菌驯化液、黑曲霉驯化液;所述多变鱼腥藻液、产黄纤维单胞菌驯化液、枯草芽孢杆菌驯化液以及黑曲霉驯化液分开使用。
进一步地，所述多变鱼腥藻驯化液按照如下工艺制备而得：
1)取羟甲基纤维素废水，往废水中添加尿素0.5g、碳酸氢钠6g、磷酸氢二钾0.2g、磷酸二氢钾0.2g、氯化钠0.3g、氯化钾0.3g、柠檬酸铁铵0.03g、乙二胺四乙酸二钠0.03g，搅拌均匀，定容至1L，制得藻类驯化培养基;
2)将多变鱼腥藻按照常规培养获得种子液，然后按照1:10的体积比转入藻类驯化培养基，培养12小时，得到多变鱼腥藻驯化液。
进一步地，所述产黄纤维单胞菌驯化液、按照如下工艺制备而得：
1)取羟甲基纤维素废水，往废水中添加葡萄糖30-40g，酵母粉15-20g，磷酸二氢钾2-3g，磷酸氢二钾2-3g，硫酸镁2-3g，碳酸钙1-2g，硫酸亚铁1-2g，搅拌均匀，定容至1L，制得菌株驯化培养基;
2)将产黄纤维单胞菌按照常规培养获得种子液，再按照1:10的体积比转入菌株驯化培养基，培养12-16小时，得到产黄纤维单胞菌驯化培养液。
进一步地，所述枯草芽孢杆菌驯化液按照如下工艺制备而得：
1) 取羟甲基纤维素废水，往废水中添加葡萄糖30-40g，酵母粉15-20g，磷酸二氢钾2-3g，磷酸氢二钾2-3g，硫酸镁2-3g，碳酸钙1-2g，硫酸亚铁1-2g，搅拌均匀，定容至1L，制得菌株驯化培养基;
2)将枯草芽孢杆菌按照常规培养获得种子液，再按照1:15的体积比转入菌株驯化培养基，培养18-24小时，得到枯草芽孢杆菌驯化培养液.
进一步地，所述黑曲霉驯化液按照如下工艺制备而得：
1) 取羟甲基纤维素废水，往废水中添加葡萄糖30-40g，酵母粉15-20g，磷酸二氢钾2-3g，磷酸氢二钾2-3g，硫酸镁2-3g，碳酸钙1-2g，硫酸亚铁1-2g，搅拌均匀，定容至1L，制得菌株驯化培养基;
2)将黑曲霉按照常规培养获得种子液，再按照1:10的体积比转入菌株驯化培养基，培养18-24小时，得到黑曲霉驯化培养液。
本发明还要求保护上述任一权利要求所述的微生物制剂的制备方法及其在修复羟基甲纤维素废水中的应用。
本发明有益效果主要包括以下几个方面：
本发明采用四种微生物，配伍合理，协同性能好，能够促进微生物增殖以及酶活力，修复废水效果好;
产黄纤维单胞菌能够利用纤维素类物质作为养料，产生糖类物质作为黑曲霉的养料;枯草芽孢杆菌产蛋白酶、糖苷酶、淀粉酶、纤维素酶等，可以利用纤维素类物质以及无机氮作为养料;黑曲霉不能利用纤维素作为养料，但是能有效快速利用糖类物质以及无机物。
本发明中，与单独培养枯草芽孢杆菌以及产黄纤维单胞菌相比较，与黑曲霉共培养后，纤维素酶活力明显增加;可能是因为枯草芽孢杆菌以及产黄纤维单胞菌分解纤维素类物质产生的糖类化合物可被黑曲霉快速利用，酶促底物含量的降低，会加速纤维素酶的合成;
本发明中，产黄纤维单胞菌、枯草芽孢杆菌以及黑曲霉均为好养微生物，废水中含氧量较低，接入多变鱼腥藻可以在光合作用下提供产生的氧气或代谢产物，以增加培养基中的含氧量或营养分成，能够提高菌类的活性或繁殖率;
本发明使用的微生物首先经过废液驯化培养，能够更快速适应废水，在获得微生物蛋白的同时净化了水质，一举两得。